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研究背景:成功的胚胎植入是成功妊娠的开始,在胚胎植入过程中,重要标志是滋养层细胞向子宫内膜侵入,在这个过程中涉及到很多分子水平的变化。人类白细胞抗原G(HLA-G)在滋养层细胞尤其是绒毛外滋养层细胞高表达,提示它在胚胎植入过程中发挥着重要作用。目的:1)建立稳定表达HLA-G1的滋养细胞株,为研究HLA-G在滋养细胞的功能提供有效的工具;2)探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)在介导滋养细胞免疫耐受以及对滋养细胞增殖、黏附及侵袭能力的影响,了解HLA-G基因在胚胎植入及子宫螺旋动脉重塑过程中的作用。方法:1)包装HLA-G1慢病毒并以之转染HLA-G表达阴性的人滋养细胞系;2)检测HLA-G1对NK-92MI细胞对JAR细胞细胞毒作用的影响;3)分别用CCK-8比色法、溴脱氧尿苷(Brd U)ELISA法检测实验组(稳定表达HLA-G1)和对照组细胞增殖能力的变化,流式细胞技术分析其相对应细胞周期和凋亡的变化。4)细胞外基质阵列比色法、纤维连接蛋白铺底加CCK-8比色法以及子宫内膜细胞铺底加CCK-8比色法检测实验组和对照组细胞黏附能力的变化。5)穿膜小室侵袭实验(Transwell)分别检测实验组和对照组细胞侵袭能力的变化,以及缺氧和肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)对各组侵袭能力的影响。结果:1)通过慢病毒转染的HLA-G1可以在两种不同的滋养细胞株稳定表达;2)从效靶比为1.25:1开始,NK-92MI细胞对对照组的细胞毒作用开始强于实验组,随着效靶比的增加,抑制作用越发明显(P<0.05);3)实验组与对照组比较,CCK-8的吸光度值,Brd U ELISA检测的吸光度值均无明显差异(P>0.05),流式细胞分析S期细胞比例实验组为(47.07±3.15)%,对照组为(46.29±0.77)%。两组比较无统计学意义(P>0.05);两组均无明显细胞凋亡;4)细胞外基质阵列比色法、纤维连接蛋白铺底加CCK8比色法、子宫内膜细胞铺底加CCK-8比色法检测实验组与对照组吸光度值,两组相比较,吸光度值均无明显差异(P>0.05);5)Transwell小室中的穿膜细胞数,实验组(66±19)与空白对照组(67±17)比较无统计学意义(P>0.05),加入肝细胞生长因子后,实验组(40±20)浸润能力较对照组(66±19)有明显减弱(P<0.05);在缺氧条件下,JAR的浸润能力下降,但HLA-G1对HGF介导的细胞侵袭的抑制作用也变得不再显著(P>0.05)。结论:1)HLA-G是一个重要的免疫抑制分子,在介导母胎免疫耐受中发挥重要作用;2)HLA-G不能作为一个独立因素影响滋养细胞的增殖、黏附、浸润功能;3)HLA-G可以抑制HGF介导的细胞侵袭作用,这种抑制效应在缺氧条件下会减弱或消失。提示HLA-G可能与其他因素(如各种细胞生长等)因子一起参与调控滋养细胞浸润,在胚胎植入和胎盘形成过程中发挥作用。