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白细胞介素-1受体拮抗剂是一种天然存在的IL-1受体拮抗剂，它可以竞争性阻断IL-1B和IL-1膜受体的结合，对于炎症、自身免疫性疾病等具有较好的治疗效果，已成功应用于治疗多种疾病。为了提高IL-1Ra在体内的半衰期，本实验构建了IL1Ra-HSA融合蛋白，并将其在毕赤酵母中进行表达。
根据IL1-Ra的氨基酸序列以酵母偏爱的密码子将其反向翻译成编码的DNA序列。根据编码的DNA序列，合成了14个寡核苷酸片段并用重叠PCR的方法将这14个寡核苷酸拼接成完整的IL1-Ra编码基因。将此基因克隆进载体pUCM-T，转化大肠杆菌DH5a。筛选阳性克隆菌，PCR鉴定并进行序列测定。结果表明，本实验成功地克隆了IL1-Ra基因的全长序列。
根据Genebank(登陆号V00495)的人血清白蛋白HSA的cDNA序列，设计扩增引物。采用RT-PCR自人胎盘中扩增出HSA基因的全长cDNA。产物纯化后连至pUCM-T载体，转化大肠杆菌DH5a。筛选阳性克隆菌，PCR鉴定并进行序列测定。结果表明，本实验成功地克隆了HSA基因的1758bp全长cDNA，与Genebank中参照序列同源性为99.99％。
利用重叠PCR技术，体外拼接IL1Ra和HSA基因，将其插入到克隆载体pMD18-T中，构建重组质粒pMD18T-IL1Ra-HSA，限制性酶切后回收IL1Ra-HSA片断，将其插入到毕赤酵母表达载体pHBM9005B中，构建表达载体pHBM-IL1Ra-HSA。结果表明PCR拼接得到的IL1Ra-HSA融合基因与预期的一致，构建的表达载体pHBM-IL1Ra-HSA经PCR分析表明，融合基因已经成功地插入到载体pHBM9005B中。表达载体pHBM-IL1Ra-HSA经Sall线性化后电击转化毕赤酵母GS115，用MD/MM平板进行初筛，得到的重组子进行进一步的诱导表达分析。