目的：①检测卵巢癌腹水及外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)的表达含量,并体外探究其免疫抑制功能,分析其与卵巢癌临床病理参数的关系,尤其与卵巢癌初治、复发及化疗的关系,为进一步揭示CD4+CD25+Treg细胞与卵巢癌进展及化疗的关系提供实验基础。②探究卵巢癌腹腔微环境内CD4+CD25+Treg细胞发挥免疫调节功能的具体机制,为针对卵巢癌的免疫治疗提供深入的理论依据。③体外探究CD4+CD25+Treg细胞对顺铂杀伤卵巢癌细胞的影响,初步阐明CD4+CD25+Treg细胞在卵巢癌化疗过程可能起到的作用,为卵巢癌的综合治疗提供新的视角。方法：①应用流式细胞术检测卵巢癌腹水及外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞含量,分析其与卵巢癌患者临床分期、分化程度等临床病理参数的关系,并重点比较处于初治(primary disease, PD)、复发(recurrent disease, RD)及化疗后(after chemotherapy, AC)三个阶段卵巢癌患者腹水及外周血中Treg含量的差异,明确其在卵巢癌的临床意义。②应用免疫磁珠分选卵巢癌患者腹水及外周血CD4+CD25+Treg,与经羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidylester, CFSE)标记的自体CD4+CD25-效应T细胞按不同比例(0：1,1：1,1：2,1：5及1：10)共培养,检测Treg免疫抑制功能。③应用Transwell insert、中和性抗IL-10抗体或／及中和性抗TGF-β1抗体探究卵巢癌腹腔微环境内CD4+CD25+Treg介导免疫逃逸作用的具体机制。④体外扩增卵巢癌腹水分选所得CD4+CD25+Treg,并应用CCK8法体外探究不同浓度CD4+CD25+Treg对顺铂杀伤人卵巢癌细胞系SKOV-3及A2780效果的影响。结果：①卵巢癌腹水中CD4+CD25+Treg/CD4+T平均百分比(27.17%±13.46%)较外周血中(14.15%±4.80%)显著增高,差异具有统计学意义(p<0.0001)；并且其表达含量水平与卵巢癌患者年龄、病理类型及肿瘤分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05),而与卵巢癌患者临床分期具有明显联系,差异具有统计学意义(P<0.05)；另外,RD及AC阶段卵巢癌腹水及外周血CD4+CD25+Treg细胞含量均显著高于PD阶段,且差异均具有统计学意义(P<0.0001)。②体外实验结果显示,卵巢癌患者腹水中CD4+CD25+Treg细胞(suppressor cells, S cells)可有效抑制CFSE标记的自体CD4+CD25-效应T细胞(responder cells, R cells)增殖,且在S.R为1：1,1：2,1：5及1：10各比例下抑制功能Treg较外周血均显著增强,差异具有统计学意义(P<0.05)；并且卵巢癌腹水内分选所得Treg在S.R比例为1：1,1：2及1：5比例下对自体CD4+CD25-效应T细胞免疫抑制功能与患者临床分期有明显关系,且差异具有统计学意义(P<0.05),但在S.R为1：10比例下无统计学意义(P>0.05)。另外,PD阶段卵巢癌腹水Treg免疫抑制功能较RD阶段显著减弱,且差异具有统计学意义(P<0.001),但较AC阶段Treg显著增强,且差异具有显著统计学意义(P<0.001)。③体外探究证实腹腔微环境内Treg发挥免疫抑制功能不仅与分泌细胞因子IL-10及TGF-β1有明确关系,并与效应性T细胞之间细胞接触相关联,且差异具有统计学意义(P<0.05)。④CCK8法证实,在SKOV3/Treg或者A2780/Treg以比例为1：0.5,1：1,1：2,1：4共培养24h后,SKOV3或者A2780的存活率在加入顺铂48小时后较24小时及72小时均显著提高,且差异均具有统计学意义(P<0.01)；且在加入顺铂48小时后,与不同浓度Treg预培养的SKOV3与A2780存活率较未加入Treg的对照组显著升高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：①卵巢癌腹腔微环境中存在CD4+CD25+Treg,且其含量及免疫抑制功能较外周血均显著增高,提示卵巢癌腹腔内更易发生免疫逃逸作用,且其与分泌抑制性细胞因子IL-10及TGF-β1相关,而细胞间直接接触也参与此过程。②卵巢癌患者腹水及外周血中CD4+CD25+Treg含量及功能与疾病的临床分期相关,且复发阶段卵巢癌Treg含量及功能均较初治阶段提高,提示Treg升高可能参与促进肿瘤复发,另外,化疗可能促进卵巢癌患者体内Treg含量升高但减弱其抑制功能。③Treg可以降低顺铂杀伤卵巢癌细胞系SKOV3/A2780的作用,提示某种意义上Treg的存在可能会降低卵巢癌化疗的功效。