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目的研究Preptin对人成骨细胞增殖和分化的影响,并探讨其作用机制。方法原代培养的人成骨细胞取材于已排除代谢性骨病的正常成人,通过碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原酶、骨钙素表达水平和矿化结节形成鉴定成骨细胞表型。通过干预组与对照组比较,观察Preptin刺激人体成骨细胞的增殖和分化的剂量效应和时间效应；人成骨细胞的增殖用[3H] thymidine掺入法检测,分化程度用人成骨细胞裂解蛋白中碱性磷酸酶表达水平判断,分光光度计法测量p-硝基苯酚以测定碱性磷酸酶活性。通过检测释放到人成骨细胞培养基中的结缔组织生长因子(CTGF),观察Preptin是否诱导人成骨细胞CTGF表达及其剂量和时间效应,CTGF用Western blot法检测。通过小分子RNA干扰技术(siRNA)抑制人成骨细胞CTGF的表达,以及在Preptin干预前用细胞信号阻断剂(PD98059、SP600125或SB203580)预处理阻断人成骨细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导,以分析CTGF和MAPK信号通路是否以及如何在Preptin诱导人成骨细胞增殖和分化中发挥作用。p38MAPK、细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、c-Jun氨基端激酶(JNK)及其磷酸化水平p-p38、p-ERK1/2、p-JNK用Western blot法检测。结果Preptin可促进人成骨细胞增殖和增加碱性磷酸酶活性。Preptin可呈剂量和时间依赖方式调节人成骨细胞CTGF的表达,通过siRNA敲除人成骨细胞CTGF的表达可降低Preptin诱导的人成骨细胞增殖和分化。Preptin可诱导人成骨细胞ERK的磷酸化,对p38或JNK无激活作用。此外,人成骨细胞用ERK阻断剂PD98059预处理可使Preptin诱导的CTGF分泌降低,并阻断Preptin的促成骨细胞增殖和分化的效应。结论Preptin在人骨细胞中通过ERK/CTGF细胞通路调节骨合成代谢,可能是肥胖时骨量增高的机制之一。CTGF是Preptin诱导人成骨细胞增殖和分化的下游调节介质。