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本论文选用自制的大孔单分散聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球PGMA/EDMA作为基质,采用原子转移自由基聚合技术(ATRP)将甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(MATA)单体接枝到基体表面,制备了新型离子交换和亲水相互作用两种分离模式的分离材料；采用化学键合法将丁二酸酐键合到基体表面,制备了性能优异的离子交换和亲水相互作用两种分离模式的分离材料。对分离材料的色谱性能做了详细的考察,并将其应用于蛋白质和核苷的分离和实际样品宁心宝胶囊中有效成分核苷的检测、鸡蛋清中主要成分溶菌酶的分离,分离测定效果良好。论文主要包括以下几个部分：1.以自制8.0μm大孔单分散聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球(PGMA/EDMA)为基质,以甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(MATA)为单体,采用原子转移自由基聚合法,通过控制单体与引发剂的比率合成了三种不同聚合度的、链长度和接枝密度可控的新型强阴离子交换色谱(SAX)和亲水相互作用色谱(HILIC)两种分离模式的分离材料ATRP1、ATRP2、ATRP3。详细考察了在两种分离模式下对蛋白质和核苷的分离情况。(1)将合成的分离材料在离子交换模式下用于标准蛋白质的分离,详细测试了流动相pH、流动相流速对蛋白质保留时间的影响以及流速对柱压的影响,并考察了聚合反应过程,单体的接枝率和聚合物对特征蛋白的吸附性能。实验结果表明,三种不同接枝率的色谱填料的分离性能优良,均可基线分离四种酸性标准蛋白质,且随着接枝链长的增加保留时间增大。(2)在亲水相互作用模式下,评价了ATRP3对标准核苷的HILIC色谱分离性能,详细测试了流动相中对溶质核苷类化合物保留行为影响的相关因素。实验结果表明,ATRP3可以基线分离七种核苷类化合物,说明该分离材料对极性溶质的分离性能优良。将分离材料用于药物宁心宝当中主要活性成分核苷的分离检测,实验效果良好。2.以自制8.0μm大孔单分散聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球(PGMA/EDMA)为基质,采用化学键合法合成了弱阳离子交换色谱(WCX)和亲水相互作用色谱(HILIC)两种分离模式的分离材料,详细考察了两种分离模式下对蛋白质和核苷的分离情况。(1)将合成的分离材料在离子交换模式下用于标准蛋白质的分离,详细测试了流动相pH、流动相流速对蛋白质保留时间的影响以及流速对柱压的影响,并考察了聚合反应过程,聚合物分离材料对特征蛋白的吸附性能。实验结果表明,该分离材料的分离性能优良,在离子交换模式下可基线分离三种标准蛋白质。该分离材料应用于鸡蛋清中溶菌酶的分离,取得了很好的分离效果。(2)将合成的分离材料在亲水相互作用模式下用于核苷类化合物的分离检测,详细测试了流动相中对溶质核苷类化合物保留行为影响的相关因素。实验结果表明,该分离材料可以基线分离六种核苷类化合物,说明该分离材料对极性溶质的分离检测性能优良。