基于生物发光与微流控芯片技术的免疫磁性分离和快速检测细菌的方法研究

来源 :中国科学院生态环境研究中心 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liu13948706813
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这篇文章描述了两种快速分离和检测细菌的方法,一种是基于生物发光的方法,另一种是基于微流控芯片的方法。这两种方法所采用分离细菌的方法均是免疫磁性分离法。在这种方法中,分离特异性的获得是通过免疫磁性来实现的,利用其既能特异性的捕获靶目标又易被磁场所吸附的特性可以将其与其他物质进行分离。经实验验证,分离效果可以达到98%以上。生物发光的方法来检测细菌是通过萤火虫萤光素-ATP反应来实现的,在此方法中,可以通过定量检测细菌中的ATP的含量来确定细菌的浓度,细菌中的ATP的释放是通过添加苯扎氯铵(BAC)来实现的,在实验中,我们发现BAC不仅可以作为ATP的释放剂也是发光强度的增强剂,当BAC的浓度为2.7×10-2%时,发光的增强效果最大,是不加BAC的10倍以上。基于微流控芯片的方法则实现了分离与检测的同步完成,并且可以同时在线检测两种不同的细菌,它的原理是通过被外加磁场固定在微通道中的不通位置的免疫磁珠捕获相应的标记有FITC的细菌,而后通过荧光显微镜肉眼直接观察即可得到结果,整个流程耗时约10~20分钟,具有极大的应用潜力。  
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