大剂量埃索美拉唑对雄性大鼠骨量和骨微结构影响的研究

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[目的]质子泵抑制剂(proton pump inhibitors,PPIs)被广泛应用于治疗各种酸相关性疾病,它是通过阻断胃壁细胞内的质子泵,即H+/K+-ATP酶,阻断酸分泌的最后途径来发挥抑酸作用的。但是近年来许多临床回顾性研究报道PPIs的使用可以增加人群骨折发生的危险。在本实验中,我们主要前瞻性研究大剂量埃索美拉唑对雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠骨量和骨微结构的影响。[方法]动物分组将24只3月龄雄性SD大鼠按体重随机分为对照组、小剂量组和大剂量组三组,通过灌胃给予埃索美拉唑。小剂量组按10mg/(kg·d)的剂量,大剂量组按50mg/(kg-d)的剂量给予埃索美拉唑,对照组给予赋形剂。实验共进行14周,每周记录两次体重,给药剂量随体重调整。骨密度(bone mineral densities,BMD)和显微 CT(Micro-computed tomography,Micro-CT)检查第0,8,14周用双能X线吸收(Dual X-ray Absorptiometry,DXA)骨密度仪测定了每只大鼠的全身骨密度,再进行体外显微CT检查评估其骨微结构的改变,通过图像的重建分析得到骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV,%)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th,mm)、骨小粱数量(trabeculae number,Tb.N,mm-1)及皮质骨厚度(cortical wall thickness,CWT,mm)等参数。血钙和骨代谢指标测定第0,8,14周分别用生化分析方法和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测每只大鼠血清中钙(calcium,Ca)及骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,B-ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartate resistant acid phosphatase 5b,TRACP 5b)的浓度。骨组织形态学检查在处死大鼠前,剖取其左侧近端股骨,将组织固定、包埋、切片后进行HE(hematoxylin-eosin)染色,于光学显微镜下观察大鼠股骨组织形态的变化并计算其空骨陷窝率(empty bone lacuna rate,ER)。[结果]体重增长在14周时,对照组大鼠平均体重明显增长(P<0.01),大剂量组大鼠的平均体重增长较其他两组明显受抑制,这一现象在第4周时就已经观察到。骨密度和显微CT大剂量组大鼠的骨密度明显降低,对照组和小剂量组骨密度均增长,且在14周时三组间差异显著(P<0.05)。骨微结构参数结果提示,大剂量组大鼠的皮质骨厚度较其他两组明显减小,骨小梁骨体积分数、骨小梁厚度、骨小粱数量均减少,而骨小梁分离度增加。血钙和骨代谢指标在14周时,大剂量组血清中Ca、B-ALP和TRACP 5b的浓度均升高,与对照组和小剂量组差异明显,而这一差异在第8周时并不显著。对照组和小剂量组的各浓度在两个时间点均未发现明显差异。骨组织形态学结果显示三组间的股骨微结构差异明显,大剂量组大鼠的股骨切片在低倍镜下可见皮质骨变薄,有大量空骨陷窝,高倍镜下可见骨小梁结构稀疏,排列不规则,部分存在中断,髓腔中血管较少。空骨陷窝率明显增高(P<0.05)。[结论]大剂量埃索美拉唑能使大鼠骨量减少,并使骨微结构退化,这种效应还存在一定的时间依赖性。其机制可能是埃索美拉唑引起的胃酸不足导致钙吸收不良,而使骨质的钙化障碍,同时激素调节导致的破骨细胞活化增加骨吸收,最终导致骨量减少并使骨微结构退化。
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