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本文以草鱼(Ctenopharyngodonidellus)为研究对象,探讨了饲料中棉粕替代鱼粉蛋白对不同生长阶段草鱼的影响,以研究不同生长阶段草鱼对棉粕的利用能力的差异性及其原因。实验分三个阶段,主要研究内容为:选用初始体重分别为6.67、100.05、760.9g的草鱼为研究对象,用棉粕分别替代饲料中的0、20、40、60、80、90、100%(分别用C、R20、R40、R60、R80、R90、R100表示)鱼粉蛋白,通过生长实验,确定不同生长阶段草鱼饲料中棉粕替代鱼粉蛋白的比例,并评价棉粕的使用对不同生长阶段草鱼的生长、饲料利用、消化酶活性、血液生理、形态学指数、组织学和免疫应答和相关基因等的影响。
主要研究结果如下:
1)实验1对小规格草鱼(平均体重6.67g)的研究结果表明,随饲料中棉粕含量升高,草鱼特定生长率和饲料效率升高,在20%替代达到最大值(P<0.05)。随着棉粕含量进一步升高,呈现显著下降的趋势(P<0.05);蛋白贮积率和能量贮积率显著降低(P<0.05)。通过回归分析,棉粕可以替代鱼粉蛋白42.7%(以特定生长率为标准)或37.6%(以饲料效率为标准)而对草鱼不产生负面影响。
2)随饲料中棉粕含量升高,草鱼血清谷丙转氨酶呈现上升趋势,R100组显著高于对照组(P<0.05);谷草转氨酶、总胆固醇、高密脂蛋白胆固醇呈现下降趋势,棉粕替代组显著低于对照组(P<0.05);低密脂蛋白胆固醇呈现下降趋势,当替代水平高于60%显著低于对照组(P<0.05);甘油三酯呈现上升趋势,当替代水平高于80%显著高于对照组(P<0.05)。
3)各组草鱼之间白细胞吞噬率和髓过氧化物酶活性无显著差异;R90组的替代途径补体溶血活力含量显著低于对照组和R40、R60组(P<0.05),其他各组之间无显著差异(P>0.05);超氧化物歧化酶活性随着饲料中棉粕含量的升高先下降,并在R80组达到最低值(P<0.05),随着替代比例的进一步升高,其活性呈现上升的趋势;R90、R100组血清白蛋白含量和对照组无显著性差异(P>0.05),其他组的血清白蛋白含量显著低于对照组(P<0.05)。血清碱性磷酸酶活性随着饲料中棉粕含量的升高呈现下降的趋势,棉粕替代组显著低于对照组(P<0.05)。
4)草鱼中肠消化酶活性随饲料中棉粕含量的升高而下降,胰蛋白酶下降但是各组之间没有显著差异(P>0.05),R100组的糜蛋白酶活性显著低于对照组(P<0.05),R60组替代水平处理组的淀粉酶活性显著低于对照组(P<0.05)。
5)实验2对中规格草鱼(平均体重100.05g)的研究结果表明,随饲料中棉粕含量升高,草鱼特定生长率呈下降的趋势,当替代比例大于60%,显著低于对照组(P<0.05);饲料效率、蛋白贮积率和能量贮积率显著降低(P<0.05)。因此,棉粕可以替代鱼粉蛋白43.3%而不影响草鱼的生长。
6)各组草鱼之间血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶和甘油三酯含量无显著差异(P>0.05);总胆固醇、高密脂蛋白胆固醇和低密胆固醇呈现下降趋势,当替代水平高于40%显著低于对照组(P<0.05)。
7)草鱼的白细胞吞噬率和对照组无差异;随着饲料中棉粕含量的升高,呼吸爆发呈现上升的趋势(P<0.05),R20和R60组和对照组无显著性差异(P>0.05),其他各组显著高于对照组(P<0.05);各组之间草鱼的替代途径补体溶血活力、血清超氧化物歧化酶活性无显著性差异(P>0.05);随着饲料中棉粕含量的升高,血清白蛋白含量呈现显著下降的趋势(P<0.05),R80、R90和R100血清白蛋白含量显著低于对照组和R20组(P<0.05),其他各组的血清白蛋白含量无显著性差异(P>0.05);随着饲料中棉粕含量的升高,血清丙二醛含量呈现显著下降的趋势(P<0.05)。血清碱性磷酸酶活性随着饲料中棉粕含量的升高呈现下降的趋势,当替代水平高于40%显著低于对照组(P<0.05)。
8)草鱼中肠消化酶活性随饲料中棉粕含量的升高而出现先上升而后下降的变化(P<0.05),R40组的中肠胰蛋白酶活性和糜蛋白酶活性均最高,淀粉酶活性随替代水平升高下降,R40组的淀粉酶活性显著低于对照组(P<0.05)。在R100组的肝胰脏中检测到胰蛋白酶和淀粉酶的最高表达丰度,而其余各组均无区别。
9)棉粕替代鱼粉蛋白显著影响鱼体的水分含量(P<0.05),当替代比例大于80%,鱼体的水分含量显著高于对照组(P<0.05);各组之间鱼体的蛋白质和灰分含量无显著性差异(P>0.05)。
10)实验3对大规格草鱼(平均体重760.9g)的研究结果表明,随饲料中棉粕含量升高,草鱼特定生长率呈下降的趋势,当替代比例大于60%,显著低于对照组(P<0.05);饲料效率、蛋白贮积率和能量贮积率呈现和特定生长率一样的趋势。棉粕可以替代鱼粉蛋白60.0%而不影响草鱼的生长。
11)随饲料中棉粕含量升高:草鱼血清谷丙转氨酶呈现上升趋势,R100组显著高于对照组(P<0.05);各组之间血清谷草转氨酶活性、甘油三酯含量无显著差异(P>0.05);总胆固醇和低密胆固醇呈现下降趋势,棉粕替代组均显著低于对照组;血清高密脂蛋白呈现下降趋势,当替代水平高于40%显著低于对照组。
12)各组草鱼之间的白细胞吞噬率、呼吸爆发、血清替代途径补体溶血活力、超氧化物歧化酶活性以及丙二醛含量无显著性差异(P>0.05);血清白蛋白含量呈现显著下降的趋势(P<0.05),当替代比例大于80%显著低于其他组(P<0.05)。血清碱性磷酸酶呈现下降趋势,当替代水平高于60%显著低于对照组(P<0.05)。
13)大规格草鱼中肠胰蛋白酶活性随饲料中棉粕含量的升高出现先上升后下降的趋势,差异不显著(P>0.05);糜蛋白酶活性的的变化趋势相同,统计学上差异显著(P<0.05),R20组胰蛋白酶活性和糜蛋白酶活性均最高。淀粉酶活性随替代水平升高下降,R100组的淀粉酶活性显著低于对照组(P<0.05)。在R100组的肝胰脏中检测到胰蛋白酶和淀粉酶的最高表达丰度,而其余各组均没有区别。
14)棉粕替代鱼粉蛋白对草鱼的全鱼、肌肉的生化组成无显著影响(P>0.05);棉粕替代鱼粉蛋白显著影响肝脏的水分含量(P<0.05),当替代比例大于60%,鱼体的水分含量显著高于对照组(P<0.05);R20组肝脏脂肪含量和R40组无显著差异外(>0.05),而显著高于其他组(P<0.05),其他各组之间肝脏脂肪含量和对照组无显著差异(P>0.05);棉粕替代鱼粉蛋白显著影响肝脏的能量含量(P<0.05),当替代比例大于80%,肝脏的能量含量显著低于对照组(P<0.05)。
15)各组草鱼背肌之间的硬度、黏附性、弹性、内聚性、胶粘性、咀嚼性和回弹性均无显著性差异(P>0.05)。
16)各规格草鱼中肠的γ-谷氨酰转肽酶活性随棉粕添加水平而显著下降(P<0.05),同时观察草鱼消化道的显微结构以及亚显微结构,这说明棉粕的添加对肠道上皮组织、肠道细胞的生理状态和结构均产生一定影响。
总之,本论文结果表明:小规格、中规格和大规格草鱼饲料中棉粕替代鱼粉蛋白的比例分别达42.7%(以特定生长率为标准)或37.6%(以饲料效率为标准)、43.3%、60.0%而不影响草鱼的生长。