目的：观察INK4A信号通路对人骨骼肌卫星细胞(ScienCell,Cat.NO3510)衰老的诱导及对线粒体功能的影响。　　方法：在构建重组慢病毒载体pLVX-p16ink4a-ZsGreen测定最佳感染复数(MultiplicityofInfection,MOI)及监测慢病毒表达时间的前提下,构建重组慢病毒载体pLVX-p16ink4a感染第二代人骨骼肌卫星细胞,并用慢病毒空载体pLVX-MCS作阳性对照,PBS作阴性对照。基因转染7天后,用β-半乳糖苷酶染色鉴定细胞衰老程度,用JC-1染色和流式细胞仪分别检测线粒体膜电位水平,用qRT-PCR(RealtimeQuantitativePCR)法测定p16ink4amRNA水平,Westernblotting法测定蛋白水平。　　结果：重组慢病毒载体pLVX-p16ink4a-ZsGreen在MOI=60感染人骨骼肌卫星细胞3天左右后即可见细胞发出绿色荧光,感染效率达90％以上,到第7天时,荧光效应依然明显。qRT-PCR法与Westernblotting法结果分别表明携带p16ink4a基因的慢病毒载体感染组细胞p16INK4amRNA与蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。重组慢病毒pLVX-p16ink4a载体感染组(VP16组)细胞胞浆经β-半乳糖苷酶染色后有明显的蓝染,而对照慢病毒pLVX-MCS空载体感染组(CP16组)和正常细胞组(NC组)胞浆蓝染微弱。经JC-1染色后,VP16组细胞呈现绿色荧光,而CP16组和NC组均呈现黄色荧光,差异明显;流式细胞仪测定结果显示VP16组细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.05)。CP16组和NC组相比均无统计学意义(P>0.05)。　　结论：INK4A信号通路的上调能诱导人骨骼肌卫星细胞的衰老,并使线粒体膜电位下降,功能受损。INK4A通路与线粒体通路存在相互作用关系。