猴耳环种子生物学特性、逆境萌发生理特性及其种苗分级标准的研究

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种子、种苗是中药材规范化生产的源头和基础,优良的种子、种苗是实现中药材质量稳定的保证。国家药品与食品监督管理局发布与实施的《中药材生产质量管理规范》(GAP),从源头上控制中药材的质量,得以保证中药材的安全、稳定、有效。因此,建立中药材规范化种植基地,种子种苗质量的好坏是关键。猴耳环Pithecellobium clypearia (Jack) Benth为豆科含羞草亚科猴耳环属植物,以干燥的嫩枝叶入药,具有清热解毒、凉血消肿、止泻的功效,是岭南地区常用中草药,临床上主要用于治疗上呼吸道感染、急性胃肠炎、急性咽喉炎、急性扁桃体炎。常见的单味制剂猴耳环消炎片、猴耳环消炎胶囊是我国预防抗生素滥用重点推广项目,是国家中药保护品种。目前猴耳环药材主要来源十野生资源,市场上对猴耳环药材需求量不断增加,造成了该物种的野生资源蕴藏量急剧下降;为了实现猴耳环药材资源的可持续利用,开展猴耳环人工栽培势在必行。本课题通过对猴耳环种子生物学特性、逆境萌发生理特性的研究,探讨了猴耳环种子的发芽适宜条件及逆境萌发的作用机理,为猴耳环种子储藏、播种育苗及开发利用提供科学依据;同时提出了猴耳环种苗的分级标准,为猴耳环药材质量标准的制定及优良品种的选取培育提供一定的参考资料。1国内外研究综述查阅了与本课题相关的国内外文献资料,总结了猴耳环的本草考证、生药学、化学成分、药理作用、临床应用、制剂研究及质量标准等方面的研究,重点概述了猴耳环种质资源及药用植物逆境胁迫两方面的研究现状。2猴耳环种子生物学特性研究常规指标分析:猴耳环新鲜种子纵径10.02~14.71mm,横径7.83~12.37mm,厚6.27~10.02mm;净度为70.89%,重量测定方法选用百粒法,值为542.6g;水分测定方法为粗磨预处理种子,采用高恒温烘干法,时间为2h,含水量为35.1%;活力测定方法选用0.5%的四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)溶液于30℃染色5h,活力为68~72%;低温保存新鲜种子的寿命为3个月。萌发试验:猴耳环种子萌发的适宜温度为30℃,播种前应用0.1%百菌清消毒30min置于纱布床中培养。植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、赤霉素(GA3)、吲哚-3-乙酸(IAA)对种子萌发都有一定的抑制作用。3猴耳环种子逆境萌发生理特性的研究水分胁迫条件下,种子发芽率、发芽指数均呈下降趋势,平均发芽速度均呈上升趋势;PEG浓度高于5%以上对种子萌发及生长均造成伤害。猴耳环种子萌发过程中可溶性糖、膜透性、Pro、可溶性蛋白及MDA含量和SOD、POD及CAT活性有不同程度增加,但与PEG浓度不呈正相关。温度胁迫条件下,3个萌发指标暂时受到抑制,胁迫解除后,有一定程度集中萌发现象;膜透性、可溶性糖、Pro及可溶性蛋白含量随时问的延长不同程度大量增加。高温处理组的SOD、POD、CAT活性在胁迫期间内先上升,胁迫结束后开始降低;低温处理组SOD、POD、CAT活性总体上随着胁迫时间的延长呈逐级下降的趋势。通过综合分析各指标及其内在联系,各胁迫对猴耳环种子萌发影响顺序为:水分胁迫>高温胁迫>低温胁迫。结果表明,猴耳环种子含水量直接影响其活力。4猴耳环种苗分级标准的研究猴耳环幼苗的分级标准为:Ⅰ级苗:H≥20.07cm,D≥0.48cm;Ⅱ级苗:20.07cm>H≧15.13cm,0.48cm> D≧0.39cmⅢ级苗H<15.13cm, D<0.39cm。种植时要选择优良的Ⅰ、Ⅱ级苗,杜绝Ⅲ级苗移栽。
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