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坏死性小肠结肠炎（Necrotizing enterocolitis, NEC）是新生儿严重的肠道炎症性疾病，大多发生在早产儿，特别是极低出生体重儿（Very low birth weight, VLBW）。严重的 NEC可能需要手术干预，而手术干预的 NEC患儿死亡率较高。另外术后除了容易发生短肠综合征、消化不良等并发症外，还会导致神经发育障碍。目前认为 NEC与早产、人工喂养、肠道过激炎症反应等有关，然而确切的发病机制目前不太清楚。Toll样受体（ Toll like receptors，TLRs）是一类跨膜受体，通过识别相应的病原相关模式分子（ Pathogen associated molecular pattern, PAMP）然后释放信号，是先天免疫的重要组成。目前发现 TLR4信号与 NEC发病关系密切。适当的 TLR4信号释放对肠道的免疫反应以及肠道发育是有益的，然而过度的 TLR4信号释放会引起肠道严重炎症反应，最终引起 NEC。Toll作用蛋白（ Toll interacting protein, TOLLIP）及单 Ig区 IL-1相关受体（ Single Ig IL-1-related receptor, SIGIRR）是 TLR4信号中的抑制因子， TOLLIP和 SIGIRR可以减轻TLR4的信号传递，减轻炎症反应。 双歧杆菌是益生菌中的一种，是肠道优势菌群之一。虽然随机对照试验（ Randomized controlled trials, RCTs）发现双歧杆菌可以有效预防早产儿发生 NEC发生，但是双歧杆菌预防 NEC的效果一直存在争议，双歧杆菌预防 NEC的作用机制尚未清楚。本文旨在研究双歧杆菌对新生 SD大鼠坏死性小肠结肠炎动物模型的影响并从双歧杆菌对 TLR4、TOLLIP和 SIGIRR基因表达的调节方面阐明可能的机制。 目的：研究双歧杆菌对新生 SD大鼠 NEC模型肠道损伤的保护作用，并探讨双歧杆菌对 TLR4、TOLLIP和 SIGIRR mRNA表达的影响，探讨双歧杆菌保护肠道损伤的可能机制。 方法：（1）实验动物分组：成年 Specific pathogen free(SPF)级雄性及雌性 SD大鼠分别3只和6只，按照雄雌比例1:2合笼。合笼第二天清晨检查雌性 SD大鼠在是否有阴道栓确定为妊娠第0天。在孕21天剖腹获取早产新生 SD大鼠45只。将45只新生大鼠随机分成正常组（ n=14）、NEC组（ n=16）和干预组（ n=15）。（2）NEC动物模型建立：正常组新生 SD大鼠交由近日生育的母鼠代乳。NEC组及干预组的新生 SD大鼠采用 Esbilac动物配方奶进行人工喂养。首次在生后2h后开始，每次喂养量为0.15ml，之后每4h一次，24h后增加至0.2ml/次。NEC组和干预组新生 SD大鼠在进食第一餐后开始造模。将新生SD大鼠置入缺氧箱中，调节氮气流量为15 L/min往缺氧箱内通气，当测氧仪下降至0时开始计时，90 s后结束氮气通气并打开缺氧箱。随后将新生大鼠置入4℃冰箱冷藏室中，持续10 min。每日进行缺氧和冷刺激2次，2次间隔12h，连续72h。（3）干预方法：每日往干预组新生 SD大鼠的配方奶中添加2次双歧杆菌，每次1×108cfu，两次间隔12h。 NEC组和正常组无添加双歧杆菌。（4）标本采集：生后72h采取颈椎脱臼法处死三组新生大鼠，对腹部进行解剖。取出十二指肠至回盲部的肠管。取近回盲部2cm肠管分别置于中性甲醛溶液和－70℃保存。（5）观测指标：各组新生大鼠一般表现、体重变化、72h存活率、肠道病理评分、NEC发生率，采用荧光定量 PCR方法检测 TLR4、TOLLIP及 SIGIRR mRNA表达并进行组间比较。 结果：（1）正常组新生大鼠活力佳，叫声响，无黏液血便和腹胀等 NEC表现。NEC组新生大鼠活动少，叫声弱，大部分出现黏液血便及腹胀等 NEC表现。干预组情况好于 NEC组但弱于正常组，出现腹胀、便血等 NEC表现较轻。（2）正常组新生大鼠72h内体重逐渐增长（ P<0.05），NEC组新生大鼠体重逐渐减轻（ P<0.05），干预组体重没有显著改变（P>0.05）。（3）NEC组72h存活率56％（9/16），干预组87%（13/15），正常组100%，干预组与 NEC组存活率差异有统计学意义（ P<0.05）。（4）正常组、NEC组和干预组肠道病理评分分别为0分、（2.4±1.0）分和（1.3±0.6）分，干预组与 NEC比较，肠道病理评分降低（ P<0.05）。（5）正常组、NEC组和干预组 NEC发生率分别为0（0/14）、78%（7/9）和23%（3/13），干预组与 NEC比较，NEC发生率降低（ P<0.05）。（6）正常组、NEC组和干预组 TLR4 mRNA相对表达量分别为1.00±0.38、3.64±1.73和1.78±0.70；TOLLIP mRNA相对表达量分别为1.00±0.85、0.23±0.15和0.86±0.62；SIGIRR mRNA相对表达量分别为1.00±0.58、0.27±0.12和0.71±0.49。NEC组 TLR4 mRNA表达高于正常组， TOLLIP以及 SIGIRR mRNA表达低于正常组（ P均<0.05）。干预组 TLR4 mRNA表达低于 NEC组，TOLLIP和 SIGIRR mRNA表达高于 NEC组（ P均<0.05），但与正常组进行比较，TLR4、TOLLIP和 SIGIRR mRNA表达差异无统计学意义（ P分别为0.63、0.614和0.146）。 结论：早产、人工喂养及缺氧冷刺激可诱导新生大鼠肠组织产生接近人类新生儿 NEC样病理改变。NEC发生机制可能与 TLR4表达增高、TOLLIP和 SIGIRR表达下调有关。经肠道添加双歧杆菌改善新生大鼠 NEC模型临床症状，减轻肠组织损伤，降低 NEC发病率。双歧杆菌可能是通过下调 TLR4及上调 TOLLIP和 SIGIRR表达起保护作用。