背景:类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病,主要表现为滑膜炎和不可逆骨破坏。破骨细胞是参与RA关节破坏的主要细胞,而RANKL的分泌增加是破骨细胞分化的必要条件。1,25（OH）₂D₃是人体内的活性维生素D,在调节机体免疫功能、影响骨代谢方面发挥着重要作用。而RA患者中普遍存在着1,25（OH）₂D₃的缺乏。RA滑膜表达的IL-22具有促炎和骨质破坏作用,IL-22的可通过JAK-2/STAT-3和p38 MAPK/NF-κB信号通路,促进RANKL的表达,进而影响破骨细胞的形成。我们前期研究发现1,25（OH）₂D₃可降低RA中IL-22的水平,并且呈剂量依赖性的下调RANKL的表达。于是我们推测1,25（OH）₂D₃可能通过阻断“IL-22→JAK-2/STAT-3和p38 MAPK/NF-κB”信号途径,抑制RA破骨细胞的形成。目的:1.研究1,25（OH）₂D₃在RA中的作用;2.研究1,25（OH）₂D₃是否通过阻断“IL-22→JAK-2/STAT-3和p38 MAPK/NF-κB”信号途径,抑制RA患者破骨细胞的形成。方法:1.回顾性分析1,25（OH）₂D₃在RA中的作用;2.从RA患者的滑膜组织中分离培养FLS至4-6代,从健康志愿者外周血中分离MN（单核细胞）,均加入M-CSF（25ng/mL）预处理;3d后,将两者共培养,同时按分组加入RANKL（30ng/mL）,M-CSF（25ng/mL）,IL-22（10ng/mL）,1,25（OH）₂D₃（1nM）,信号转导蛋白抑制剂等药物,分为以下五组:a组:MN+M-CSF+RA-FLS+1,25（OH）₂D₃+IL-22;b组:MN+M-CSF+RA-FLS+1,25（OH）₂D₃+Il-22+pd9805（mek-1通路抑制剂）;c组:mn+m-csf+ra-fls+1,25（oh）2d3+il-22+parthenolid（nf-κb抑制剂）;d组:mn+m-csf+ra-fls;e组:mn+m-csf+ra-fls+rankl。在共培养14天后处理,固定玻片上细胞并行trap染色,观察破骨细胞生成的情况;用real-timepcr检测所加药物对破骨细胞表面的标志物trap、组织蛋白酶k、基质金属蛋白酶（mmp）-9mrna的表达的影响。3.数据分析采用spss17.0软件。结果:1.（1）ra组血清水平低于健康对照组,差异有统计学意义[(15.67±7.27ng/ml与（20.08±7.14）ng/ml,t=-3.87,p<0.05].（2）血清25-羟维生素d水平与bmi、das28评分、esr、crp呈负相关（r=-0.735、-0.539、-0.343、-0.539,p均<0.01）;血清25-羟维生素d水平与ts细胞呈正相关（r=0.636,p<0.01）。（3）根据病情活动度（das28评分）分组后,病情高活动组（das28>5.1）血清25-羟维生素d水平[（13.83±8.42）ng/ml]与esr[（73.17±31.21）mm/h]呈负相关（r=-0.381,p<0.01）;血清25-羟维生素d水平[（13.83±8.42）ng/ml]与das28评分[（6.80±1.11）mm/h]呈负相关（r=-0.567,p<0.01）。3组间血清25-羟维生素d水平比较差异有统计学意义（f=132.839,p<0.01）。（4）根据不同bmi水平分组后,在超重组（bmi≥24kg/m2）,25-羟维生素d水平与esr呈负相关（r=-0.395,p<0.05）;在肥胖组（bmi≥28kg/m2）,25-羟维生素d水平与esr呈负相关（r=-0.385,p<0.05）。3组间血清25-羟维生素d水平比较差异有统计学意义（f=31.41,p<0.01）。（5）在抗-ccp阳性组,25-羟维生素d水平与das28评分呈负相关（r=-0.464,p<0.01）。抗-ccp阳性组25-羟维生素d水平低于抗ccp阴性组,差异有统计学意义（t=-3.08,p<0.01）。2.real-timepcr结果（1）实验组中,b组和c组分别加入不同的通路抑制剂。b组与a组相比目的基因表达相对增加,且差异有统计学意义（p<0.05）;c组和a组相比目的基因表达相对增加,且差异有统计学意义（p<0.05）;（2）对照组中,阳性对照组d组目的基因表达量比阴性对照组e组目的基因表达量相对增加,且差异有统计学意义（P<0.05）;（3）在加入通路抑制剂实验组,b组（加入MEK-1抑制剂PD98059）与c组（加入NF-κB抑制剂parthenolide）目的基因相对表达量差异有统计学意义（P<0.05）。TRAP染色结果（4）实验b组破骨细胞计数多于实验a组,并且差异有统计学意义（P<0.05）;（5）实验c组破骨细胞计数多于实验a组,并且差异有统计学意义（P<0.05）;（6）对照组d组破骨细胞计数多于对照e组组,且差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.1,25（OH）₂D₃与RA相关密切,在RA的发生、发展中可能具有一定作用;2.1,25（OH）₂D₃能够阻断IL-22介导的JAK-2/STAT-3和p38 MAPK/NF-κB通路进而抑制RA破骨细胞的生成。