pcDNA3．1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liu716313

【摘要】

：

目的构建pcDNA3．1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA，RT-PCR法反转录合成CDNA，设计引物，调取目的片段，与pcDNA3．1-flag载体连接后转

【作者】

：

王海东王占祥马永会谭国伟骆启聪程鹏

【机构】

：

厦门市第一医院神经外科,厦门大学生命科学院发育与肿瘤细胞实验室

【出处】

：

中国实验诊断学

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

pygo2基因C6细胞载体真核表达 WNT信号 C6 cell vector eukaryotic expression wnt signaling

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目的构建pcDNA3．1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA，RT-PCR法反转录合成CDNA，设计引物，调取目的片段，与pcDNA3．1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α，LB平板筛选菌落，提取质粒。重组质粒pcDNA3．1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后，阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA3．1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ，HindⅢ酶切分析及测序

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