人二氢乳清酸脱氢酶蛋白的表达、纯化及其与新型抑制剂的晶体结构

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuezhenqian
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人二氢乳清酸脱氢酶(human dihydroorotate dehydrogenase,hDHODH)是催化嘧啶从头合成途径的一个关键酶。近年来,多种研究表明,抑制该酶可缓解类风湿性关节炎的症状。但该酶的抑制剂甚少,寻找该酶的高效抑制剂具有重要意义。本研究利用PCR技术扩增hDHODH基因,构建重组质粒pET-19b-hDHODH,并在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) BL21(DE3)中表达,获得可溶性蛋白质。用Ni~(2+)-NTA亲和层析柱对蛋白质进行纯化,获得较高(90
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