【摘 要】
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目的为了建立一种快速、简便而准确地筛选递次截短的ＤＮＡ克隆的技术，加速对基因全长ｃＤＮＡ或ＤＮＡ大片段的测序和鉴定。方法在载体多克隆位点两侧设计引物，直接ＰＣＲ扩增插入片段，以此为基础选择系列
【基金项目】
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国家863高技术项目,国家自然科学基金
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目的为了建立一种快速、简便而准确地筛选递次截短的ＤＮＡ克隆的技术，加速对基因全长ｃＤＮＡ或ＤＮＡ大片段的测序和鉴定。方法在载体多克隆位点两侧设计引物，直接ＰＣＲ扩增插入片段，以此为基础选择系列缺失亚克隆，并与常规酶切法作比较。结果根据ＰＣＲ产物大小排序，准确地鉴定出系列缺失亚克隆，并可将ＰＣＲ产物直接用于ＰＣＲ循环测序，比酶切法分辨率高，操作步骤简化，筛选时间短。结果所建立的ＰＣＲ快速筛选法不仅是一种行之有效的鉴定方法，而且可以显著地节省时间和实验材料。该方法也可适用于其它各种质粒载体。
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