【摘 要】
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目的根据ISO15189认可要求评价全自动单核苷酸多态性分析仪i-densy IS-5320平台检测骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因V617F突变。方法仪器性能验证。选择2014年12月至2017年2月间复旦大学附属华山医院JAK2基因V617F突变阳性外周血标本20例,JAK2基因V617F突变阴性的外周血标本20例,以TaqMan MGB探针法实时荧光定量PCR作为对照方法,经测序方法验证评价仪
【机 构】
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200040 上海,复旦大学附属华山医院中心实验室,200040 上海,复旦大学附属华山医院中心实验室,200040 上海,复旦大学附属华山医院中心实验室,200040 上海,复旦大学附属华山医院中心
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目的根据ISO15189认可要求评价全自动单核苷酸多态性分析仪i-densy IS-5320平台检测骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因V617F突变。
方法仪器性能验证。选择2014年12月至2017年2月间复旦大学附属华山医院JAK2基因V617F突变阳性外周血标本20例,JAK2基因V617F突变阴性的外周血标本20例,以TaqMan MGB探针法实时荧光定量PCR作为对照方法,经测序方法验证评价仪器直接检测全血JAK2基因V617F突变的准确性。使用全血样本分别评估检测平台的检测重复性、携带污染与交叉污染,以及抗干扰能力。取HEL细胞与HCT116细胞为突变型对照和野生型对照,配制12种不同突变细胞比例样本进行检测,以此评价检测突变负荷的能力。
结果i-densy IS-5320平台与TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法检测完全一致;批内重复性与批间重复性为100%;未观察到携带污染与交叉污染;高胆红素(总胆红素:>20.4 μmol/L)与高甘油三酯(甘油三酯:>1.8 mmol/L)血样本对突变检测无明显干扰;该平台能够稳定检出负荷低至0.25%的突变。
结论i-densy IS-5320可实现对全血直接进行JAK2基因V617F突变检测,具备较高的灵敏度、准确度和稳定性,操作简便,能够达到临床对突变的检测要求。(中华检验医学杂志,2018, 41:470-474)
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