【摘 要】
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目的 将含有小鼠白细胞介素12(mIL-12)全长基因的质粒转染到膀胱癌EJ细胞中,观察脾细胞对转染mIL-12膀胱癌细胞的杀伤作用.方法 用脂质体转染法将含有mIL-12全长基因质粒转染到EJ细胞中,ELISA法检测IL-12表达水平.在脾细胞作用0～2 d时ELISA法连续检测上清干扰素γ(INF-γ)水平变化.转染后40 h加入制备好的小鼠脾细胞悬液约1×106作用24 h后,MTT法检测对
【机 构】
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150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外三科,150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外三科,150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外三科,150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿
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目的 将含有小鼠白细胞介素12(mIL-12)全长基因的质粒转染到膀胱癌EJ细胞中,观察脾细胞对转染mIL-12膀胱癌细胞的杀伤作用.方法 用脂质体转染法将含有mIL-12全长基因质粒转染到EJ细胞中,ELISA法检测IL-12表达水平.在脾细胞作用0～2 d时ELISA法连续检测上清干扰素γ(INF-γ)水平变化.转染后40 h加入制备好的小鼠脾细胞悬液约1×106作用24 h后,MTT法检测对膀胱癌细胞的抑制率.结果 转染后40、60 h检测到IL-12的高表达(375±15)pg/ml和(400±50)Pg/ml,较未转染组9～15 pg/ml明显增高;在EJ细胞表面可以检测到IL-12的表达,而对照组则无;加入脾细胞悬液1 d后,脾细胞加转染后的EJ细胞组的抑制率为58.7%(P＜0.025),而脾细胞加未转染EJ细胞组、单纯EJ细胞组以及转染的EJ细胞组差异无统计学意义(P＞0.05).脾细胞加入转染后EJ细胞上清24 h的INF为(155±21)pg/ml,与未转染组(65±8)pg/ml比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 体外转染mIL-12基因到膀胱癌EJ细胞中能够表达IL 12,在小鼠脾细胞存在的条件下,通过一系列的免疫调节作用,诱导T细胞、NK细胞等产生INF-γ等细胞因子从而杀伤膀胱癌细胞。
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