长胞内域瘦素受体全长mRNA表达增加对骨胳肌细胞葡萄糖氧化的影响

来源 :中华内分泌代谢杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weilijay
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目的观察增加骨胳肌细胞全长长胞内域瘦素受体(OBRb)mRNA表达以后,瘦素对原代培养的骨胳肌细胞葡萄糖氧化代谢的影响.方法分离SD乳鼠的骨胳肌细胞,分4组进行细胞培养,其中转染重组质粒、转染空载质粒和非转染3组(分别加瘦素10 ng/ml和胰岛素10 mU/ml),另外1组为非转染未加瘦素和胰岛素的对照组.将载有全长OBRb cDNA的真核表达质粒或空载质粒在脂质体的介导下导入骨胳肌细胞.48 h后加入瘦素和胰岛素,孵育1 h,再加入D-[U-14C]-葡萄糖,继续培养2 h后终止反应,收集14CO2,液体闪烁计数.同时以RT-PCR检测转染细胞的OBRb mRNA表达水平.结果重组质粒转染、空载质粒转染和非转染3组,特异性条带和β-actin条带积分光密度比值分别为1.22±0.10、0.41±0.08和0.49±0.09,前者较其它两组明显升高(均P<0.001).葡萄糖氧化前者明显高于其他3组(均P<0.005).结论增加SD乳鼠骨胳肌细胞OBRb mRNA的表达,明显改善细胞葡萄糖氧化,提示OBRb mRNA的高度表达能改善瘦素的作用.

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