【摘 要】
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通过PCR方法得到去除C端201个氨基酸残基(胞浆区,跨膜区和Ser/Thr丰富区)的Kex2p的DNA片段,并将该片段装载到质粒pPICZ-C中构建成表达质粒pPICZ-C-KEX2ΔCP.经过大肠杆菌(DH5
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通过PCR方法得到去除C端201个氨基酸残基(胞浆区,跨膜区和Ser/Thr丰富区)的Kex2p的DNA片段,并将该片段装载到质粒pPICZ-C中构建成表达质粒pPICZ-C-KEX2ΔCP.经过大肠杆菌(DH5α)的扩增,表达质粒被转入甲醇酵母(GS115)中,并得以分泌表达.发酵上清液中存在切割肽链中双碱性氨基酸C端的酶活力.SDS-PAGE电泳的结果证实了Kex2p的分泌表达,以及Kex2p在溶液中的自降解.
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