开放读码框架50基因介导HIV-1感染相关的肝细胞生长因子诱导人类疱疹病毒8型复制

来源 :中华传染病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiaofangjunonline
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目的 研究人类疱疹病毒8型(HHV-8)开放读码框架(ORF)50基因启动子在HIV-1感染相关细胞因子肝细胞生长因子/驱散因子(HGF/SF)诱导原发性渗出性淋巴瘤(PEL)BC-3中潜伏感染的HHV-8复制过程中的作用.方法将HGF/SF连续加入到体外培养的BC-3中,分别于培养第3天和第7天收集刺激细胞,电子显微镜观察成熟HHV-8病毒的形成;提取细胞总RNA,North-ern blot和定量聚合酶链反应(PCR)法检查HHV-8次要衣壳蛋白ORF26 mRNA转录.同时,将已构建的HHV-8 ORF50启动子+虫荧光素酶报告基因重组质粒和含HIV-1 Tat基因重组表达质粒分别共转染BC-3和人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),转染后24 h加入HGF/SF和/或重组HIV-1gp120刺激,刺激后24 h收集细胞,进行虫荧光素酶活性检测.试验同时以佛波酯(TPA)刺激为阳性对照.结果 HGF/SF可以上调HHV-8 ORF26 mRNA表达,且于刺激的第7天,ORF26 mRNA表达上升了4.1倍,BC-3细胞中同时可观察到成熟的HHV-8病毒粒子;HGF/SF能够诱导ORF50启动子活性,但HIV-1 Tat和gp120蛋白与HGF/SF协同上调ORF50启动子活性的能力较弱.结论 HIV-1感染相关细胞因子HGF/SF诱导HHV-8复制的过程至少有部分由ORF50启动子介导。

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