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将蛇毒类凝血酶基因(TLE)亚克隆到原棱表达载体pMAL-p2X上,对重组表达质粒鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21进行诱导表达;同时采用不同的OD值、诱导时间、IPTG浓度和诱导温度对尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶基因重组表达质粒pMAL-p2X进行了条件优化。研究发现,不同的诱导时间、IPTG诱导浓度和诱导温度与融合蛋白表达量有很大关系。SDS-PAGE结果显示,当OD值为0.5,IPTG终浓度为0.3mmol/L,诱导温度为37℃时,诱导3h后蛋白表达量最高,超出此范围可使表达量显著减少。在优化诱导条件后,融