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目的
初步研究人工合成E选择素抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的机制。
方法成年雄性SD大鼠90只,按随机数字表顺序分为对照组、手术组和治疗组,每组30只。手术组和治疗组行右侧颈总动脉纵行切开和间断缝合,对照组不行血管切开。缝合血管后,治疗组和手术组从股静脉分别注入人工合成E选择素和等量生理盐水。术后第1、3、7和14天采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的浓度;取缝合口处血管组织,采用Western blot和实时定量(RT)-PCR检测NF-κB p65蛋白水平和mRNA的表达,凝胶电泳迁移率实验检测NF-κB转录活性,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)阳性的细胞率。
结果手术组和治疗组血清中TNF-α和IL-6浓度、血管组织中NF-κB p65蛋白和mRNA水平均从缝合术后第1天开始升高,第3天达高峰,第7天时仍均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),而治疗组上述指标均低于同期手术组(P<0.01),第14天3组间差异无统计学意义(P>0.05);缝合术后第3天,手术组NF-κB转录活性高于治疗组(P<0.01);手术组和治疗组PCNA阳性细胞从缝合术后第3天开始表达,对照组表达不明显或无表达,3组间差异有统计学意义(P<0.05),第7、14天仍高表达(P<0.01),而治疗组PCNA阳性细胞表达均低于同期手术组(P<0.01)。
结论人工合成E选择素可通过抑制NF-κB活性抑制血管平滑肌细胞的增殖。