【摘 要】
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目的 研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因敲除小鼠脑内细胞色素P450-1B1(CYP1B1)蛋白的表达变化及其意义.方法 按照体重将小鼠分为4组:野生型组(n=4)、eNOS基因敲除组(n=4)、
【机 构】
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福建医科大学 省立临床医学院、福建省立医院神经内科,福州,350001;福建医科大学 省立临床医学院、福建省立医院神经外科,福州,350001;福建医科大学 基础医学院生物化学与分子生物学系,福州,3
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目的 研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因敲除小鼠脑内细胞色素P450-1B1(CYP1B1)蛋白的表达变化及其意义.方法 按照体重将小鼠分为4组:野生型组(n=4)、eNOS基因敲除组(n=4)、实验组(2种小鼠各4只)和对照组(2种小鼠各4只).实验组腹腔注射2,3′,4,5′-tetramethoxystilbene(TMS,CYP1B1抑制剂)300μg·kg-1,对照组腹腔注射等剂量溶剂二甲基亚砜30μL,每天1次,连续1周.以免疫荧光染色和免疫印迹法测定小鼠的CYP1B1与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)p17表达.结果 野生型组和基因敲除组小鼠的前脑皮质区CYP1 B1免疫荧光阳性细胞数分别是(106±21)个/200×视野、(249±17)个/200×视野;这2组在纹状体区阳性细胞数分别是(85±16)个/200×、(211±23)个/200×视野,2组比较差异均有统计学意义(均P<0.001).野生型组和基因敲除组小鼠的脑CYP1 B1蛋白表达灰度值分别是0.45±0.04,1.15±0.15,2组比较差异均有统计学意义(均P<0.001).TMS干预后,实验组中野生型小鼠和eNOS基因敲除小鼠脑Caspase-3 p17蛋白灰度值分别是1.24±0.21,2.21±0.17,均显著高于对照组中的野生型小鼠和eNOS基因敲除小鼠,Caspase-3 p17蛋白灰度值分别是0.23±0.03,0.76±0.08,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.001).结论 eNOS基因敲除小鼠脑内CYP1B1蛋白表达升高并且起到抗凋亡作用,但其作用机制目前尚不明确.
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