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目的
探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。
方法取清洁Ⅱ级雄性(Sprague Dawley,SD)大鼠腹主动脉,采用贴块法培养VSMC,DMEM培养基正常培养的VSMC为空白对照组、含有10 ng/ml PDGF培养基培养的VSMC为PDGF刺激组(PDGF组)、含有10 ng/ml PDGF培养基加入不同浓度的HSYA干预的VSMC为HSYA不同浓度组(HYSA浓度分别为1、5、10、20、40及60 μmol/L)。采用MTT法分析不同浓度的HSYA对VSMC增殖的影响。采用蛋白印迹法检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平及跨膜信号转导蛋白分子的磷酸化水平。采用免疫细胞化学法检测各组PCNA的表达。
结果HSYA不同浓度(1、5、10、20、40及60 μmol/L)组VSMC增殖水平均低于PDGF组(P均<0.05),且呈浓度依赖性。HYSA不同浓度(5、10、20及40 μmol/L)组PNCA蛋白表达水平均低于PDGF组(P均<0.05)。PDGF组PDGFR磷酸化水平明显高于空白对照组(P<0.05),而HSYA不同浓度(5、10、20及40 μmol/L)组则均低于PDGF组,且呈浓度依赖性(P均<0.05)。PDGF组MEK和ERK1/2磷酸化水平均明显高于空白对照组(P均<0.05),而HSYA不同浓度(5、10、20及40 μmol/L)组则均低于PDGF组,且呈浓度依赖性(P均<0.05)。
结论HSYA可抑制VSMC增殖、降低PCNA表达,其可能是通过阻断MEK/ERK1/2信号通路抑制大鼠VSMC增殖的。