【摘 要】
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目的 筛选人精子中与PHF7相互作用的蛋白质并分析其作用.方法 构建质粒表达GST-PHF7融合蛋白,通过GST pull-down实验串联质谱检测人精子中与PHF7特异性结合的蛋白质,进行GO富
【机 构】
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北京大学第三医院泌尿外科,北京100191;北京大学第三医院生殖医学中心,北京100191;北京大学第三医院男科,北京 100191;北京大学第三医院人类精子库,北京100191
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目的 筛选人精子中与PHF7相互作用的蛋白质并分析其作用.方法 构建质粒表达GST-PHF7融合蛋白,通过GST pull-down实验串联质谱检测人精子中与PHF7特异性结合的蛋白质,进行GO富集分析和KEGG通路分析.结果 利用GST-PHF7诱饵蛋白从人精子细胞总蛋白中成功钓取靶蛋白.经过质谱检测,筛选出人精子中与PHF7特异结合的蛋白75个.GO分析结果表明,这些蛋白在生物学过程上主要富集在蛋白运输和细胞内定位等;在细胞成分上主要富集在细胞器,囊泡和外泌体等;在分子功能上主要富集在结合蛋白质,核酸和酶类等.KEGG分析结果表明,这些蛋白富集在细胞代谢和遗传信息的处理等通路.结论 PHF7与精子内多种蛋白质相互作用,调节蛋白合成,运输和降解及能量代谢等可能是其调节精子发生的机制.
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