【摘 要】
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目的 研究小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)诱导分化的血管内皮细胞永生化后的致瘤现象.方法 体外培养系中,将诱导的小鼠ESC的拟胚体分化为圆形细胞.通过脂质体将人端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTE RT)基因转染诱导分化中的圆形细胞,应用RT-PCR及免疫组织化学等方法分析、观察诱导分化的血管样结构的
【机 构】
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210003南京,南京医科大学第二附属医院整形外科,中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所
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目的 研究小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)诱导分化的血管内皮细胞永生化后的致瘤现象.方法 体外培养系中,将诱导的小鼠ESC的拟胚体分化为圆形细胞.通过脂质体将人端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,hTE RT)基因转染诱导分化中的圆形细胞,应用RT-PCR及免疫组织化学等方法分析、观察诱导分化的血管样结构的组成细胞和被hTERT基因转染的圆形细胞的形态和生物学特性.并将基因转染的细胞植入裸鼠皮下,观察其致瘤性.结果 携带hTERT基因、从ESC分化而来的圆形细胞TEC3,在体外可大量增殖,培养的前2 d(48 h),细胞数就增加了1倍多,至72 h细胞数增加了12倍,持续传代,端粒酶活性高表达,95％细胞表达Flk-1、CD34和vWF,并有管道化生长特性.将细胞植入裸鼠皮下后1周有肿瘤形成.结论 转染hTERT基因可使小鼠ESC分化细胞持续增殖,植入裸鼠体内具有致瘤性。
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