【摘 要】
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目的建立一种致死性埃博拉病毒(EBOV)的快速检测与分型方法。方法根据苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白基因的保守区序列,设计一对通用引物及特异性TaqMan探针。通过条件优
【机 构】
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吉林农业大学动物科技学院; 军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室;
【基金项目】
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农业公益性行业科研专项(No.200903037)
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目的建立一种致死性埃博拉病毒(EBOV)的快速检测与分型方法。方法根据苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒糖蛋白基因的保守区序列,设计一对通用引物及特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释质粒pblue-SG,pblue-ZG为标准品,进行Real-time PCR扩增,制作标准曲线,并进行重复性、准确性检验及特异性检测。结果 Real-time PCR检测苏丹型和扎伊尔型埃博拉病毒标准曲线相关系数均大于0.99,灵敏度可达1.0×101拷贝,高于常规PCR方法的106～107;7种其他对照烈性病病原体检测均呈阴性。结论用建立的Real-time PCR方法检测埃博拉病毒快速、灵敏、特异,重复性好,为埃博拉出血热的快速确诊奠定了基础。
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