miR-3126-5p靶向LASP1抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移的机制探讨

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目的 探讨微小RNA(miRNA)-3126-5p抑制靶基因LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1,LASP1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株(HT-29、HCT116、LoVo、SW480)和正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)中miR-3126-5p的表达水平.选择表达水平最低的细胞株作为实验对象,实验分为2组:阴性对照组(转染miR-NC)和miR-3126-5p组(转染miR-3126-5p),转染48 h后收集各组细胞.qRT-PCR法检测各组细胞miR-3126-5p的表达水平.采用MTS法和划痕愈合实验分别检测各组细胞的增殖水平和迁移能力.采用生物信息学软件microRNA.org和双荧光素酶报告基因实验分别预测和验证miR-3126-5p的靶基因.采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞靶基因的表达水平.计量资料以均数±标准差(Mean± SD)表示,两两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)相比,结直肠癌细胞株miR-3126-5p的表达水平显著降低(P<0.05),表达水平最低的细胞株是HCT116细胞(P<0.01).阴性对照组和miR-3126-5p组HCT116细胞中miR-3126-5p的表达分别为(1.05 ±0.16)和(7.91 ± 1.26),差异具有统计学意义(t =5.40,P <0.01).与阴性对照组相比,miR-3126-5p组HCT116细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),迁移能力显著下降(t =4.52,P <0.01).microRNA.org显示miR-3126-5p与LIM 和SH3蛋白1(LASP1)基因mRNA存在互补结合位点.miR-3126-5p和LASP1 mRNA能够靶向结合(P<0.01).与阴性对照组相比,miR-3126-5p组HCT116细胞中LASP1基因表达显著降低(t=4.56,P<0.01).结论 结直肠癌细胞株中miR-3126-5p呈低表达,miR-3126-5p能够通过抑制靶基因LASP1降低结直肠癌HCT116细胞的增殖和迁移能力.
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