G418抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层的制备

来源 :军事医学科学院院刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:majinrao
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目的 :制备G4 18抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层。方法 :利用一个neo基因成功整合到基因组的小鼠品系Smad3ex8+/ ,从其妊娠 14d的雌鼠中获取胚胎 ,先制备小鼠胚胎成纤维细胞 ,PCR鉴定基因型后 ,挑选一株neo基因杂合型的小鼠胚胎成纤维细胞 ,用丝裂霉素C处理即获得G4 18抗性的小鼠胚胎干细胞滋养层。结果 :利用此方法制备的滋养层能有效地支持小鼠胚胎干细胞的生长 ,在含G4 18的筛选培养基中能存活 1~ 2周 OBJECTIVE: To prepare G418-resistant mouse embryonic stem cell feeder layer. METHODS: Smad3ex8 + / a mouse strain successfully integrated into the genome was used to obtain embryos from mouse embryos at 14 days of gestation. Mouse embryonic fibroblasts were first prepared. After genotyping by PCR, a neo gene was heterozygous Type mouse embryonic fibroblasts were treated with mitomycin C to obtain G418-resistant mouse embryonic stem cell trophoblast. Results: The trophoblast prepared by this method can effectively support the growth of mouse embryonic stem cells, which can survive for 1 ~ 2 weeks in G4 18 screening medium
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