【摘 要】
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目的:探讨成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factors 21,FGF21)对胰腺癌细胞炎症环境中星状细胞增殖和活化的影响及机制.方法:RT-qPCR检测胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)作用于人胰腺癌细胞(pancreatic cancer cells,PCC)后白细胞介素(interleukin,IL)-6及IL-8 mRNA的表达水平变化,确立适宜的时间建立炎症微环境.将PCC(Capan-1和MIA PaCa-2)CCK上清液和PCC(Capan-1和
【机 构】
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重庆医科大学分子医学诊断中心病理教研室,重庆400016
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目的:探讨成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factors 21,FGF21)对胰腺癌细胞炎症环境中星状细胞增殖和活化的影响及机制.方法:RT-qPCR检测胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)作用于人胰腺癌细胞(pancreatic cancer cells,PCC)后白细胞介素(interleukin,IL)-6及IL-8 mRNA的表达水平变化,确立适宜的时间建立炎症微环境.将PCC(Capan-1和MIA PaCa-2)CCK上清液和PCC(Capan-1和MIA PaCa-2)CCK+FGF21上清液作用于人胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSC).用CCK-8和Western blot分别检测各组上清液对胰腺星状细胞活性及其活化标志物α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle protein,α-SMA)表达水平的影响.RT-qPCR和Western blot检测FGF21对CCK处理后的PCC EGR1和PDGFB mRNA及蛋白表达的影响.Western blot进一步检测AMPK抑制剂(compound C)加入PCC CCK组和PCC CCK+FGF21组后对AMPK-κB信号通路中p-AMPK和EGR1蛋白表达的影响.结果:CCK处理Capan-16 h与处理MIA PaCa-224 h的IL-8 mRNA表达量明显高于其他组(P＜0.05).PCC CCK+FGF21上清液组与PCC CCK上清液组相比,其PSC细胞增殖明显受抑制(P＜0.05),α-SMA蛋白表达明显降低(P＜0.001).FGF21干预PCC CCK后EGR1和PDGFB mRNA和蛋白表达均明显低于CCK组(P＜0.05).Compound C加入PCC CCK+FGF21组后,p-AMPK蛋白表达水平均降低(P＜0.01),EGR1蛋白表达水平均增高(P＜0.05).结论:FGF21可能通过抑制胰腺癌细胞炎症环境中星状细胞的增殖和活化来实现其对肿瘤的抑制作用,其机制可能与其激活炎症环境下胰腺癌细胞AMPK通路并下调EGR1的表达及减少PDGFB的表达有关.
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