【摘 要】
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目的构建细粒棘球蚴铁蛋白基因的重组表达质粒ferritin/pET-28a,表达、纯化出重组蛋白,并对重组蛋白的免疫学特性进行初步研究。方法将目的基因亚克隆至表达载体pET-28a,转化
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目的构建细粒棘球蚴铁蛋白基因的重组表达质粒ferritin/pET-28a,表达、纯化出重组蛋白,并对重组蛋白的免疫学特性进行初步研究。方法将目的基因亚克隆至表达载体pET-28a,转化入大肠杆菌BL21(DE3)plysS,加入IPTG对其进行诱导表达。通过Ni2+的His-bind树脂柱纯化出重组蛋白,用50μg/100μL免疫ICR小鼠,获得抗血清,通过western-blot及ELISA对重组铁蛋白的免疫学特性进行初步研究。结果表达并纯化出分子量约19kD重组铁蛋白,western-blot显示重组蛋白免疫制备的抗血清可识别纯化的重组蛋白及抗原囊液、原头蚴,位置大致相同,约19kD。ELISA结果显示实验组小鼠与对照组小鼠血清中IgG的OD值有统计学意义(P<0.01)。结论细粒棘球蚴重组铁蛋白Eg.ferritin具有较好的抗原性及免疫原性,具有成为包虫疫苗候选分子的潜能。
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