摘要 腺病毒5型E1A(Ad5E1A)作为一个抑癌基因，由于具有较强抑癌作用及显著的化放疗增敏作用而受到人们的关注．但由于它能整合到宿主细胞基因组中长期表达，并能使Rb基因失活，使动物细胞永生化等而引起人们的担心．为了避免E1A在基因治疗中存在的问题，设想以E1A蛋白进行探索．首先构建了E1A真核表达载体(pPIC9／E1A)，转化毕赤酵母(GSll5)，筛选高表达重组菌株．经摇瓶试验，甲醇诱导表达3d后，分泌型的E1A蛋白经HiTrapQ和HiTrap SP两步柱层析，获得了较高纯度的E1A蛋白，并经SDS-PAGE和Westernblot鉴定．E1A蛋白经Chariot介导能顺利进入细胞，并大部分定位在细胞核，使LN686细胞发生明显的G2／M期阻滞，体外能显著抑制LN686肿瘤细胞生长．为利用E1A蛋白在肿瘤治疗中应用的可能性提供了实验依据．
　　关键词 E1A蛋白 酵母表达系统 细胞周期 肿瘤抑制