北柴胡转录因子BcAP2-13的原核表达和多克隆抗体制备

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【摘要】

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利用带有促溶标签SUMO和纯化标签6×His的原核表达载体,构建了调控北柴胡皂苷生物合成的转录因子基因BcAP2-13的原核表达载体p13-SUMO-His6。载体热激转化大肠杆菌感受态

【作者】

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徐娇朱楚然都明理王丽红隋春魏建和

【机构】

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中国医学科学院&,北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室,佳木斯大学

【出处】

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江苏农业科学

【发表日期】

：

2019年10期

【关键词】

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北柴胡转录因子原核表达多克隆抗体制备免疫印迹

【基金项目】

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中国医学科学院医学与健康科技创新工程-重大协同创新项目(编号:2016-I2M-2-003)

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利用带有促溶标签SUMO和纯化标签6×His的原核表达载体,构建了调控北柴胡皂苷生物合成的转录因子基因BcAP2-13的原核表达载体p13-SUMO-His6。载体热激转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导培养,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,28℃和37℃不同温度诱导条件下均得到了融合蛋白13-SUMO-His 6。以Ni-NTA柱纯化的融合蛋白为抗原

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