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设计含有attB侧翼序列的引物，用于番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus）的外壳蛋白基因（CP）基因的PCR扩增。在BP重组酶的作用下，将CP基因与受体载体pDONR^TM221发生重组反应，产生入门克隆。在LR重组酶作用下，将入门克隆与目的载体pHellsgate12发生重组反应，再进行平板培养筛选及PCR扩增和酶切反应。结果证明，用限制性内切酶Xho Ⅰ酶切消化后，琼脂糖凝胶电泳获得了预期长度为1700bp的重组片段；以启动子和外壳蛋白基因及外壳蛋白基因和终止子序列为基础，分别设