牛轮状病毒结构蛋白VP4基因的真核表达

来源 :安徽农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ouyang1225

【摘要】

：

[目的]克隆获得牛轮状病毒VP4全基因,并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR技术,从牛轮状病毒总RNA中扩增出VP4基因,将其重组到含有Flag标签的pcDNA3.1（＋）载体中,经PCR、酶切和测序

【作者】

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王丹宋玲玲王洪梅杨宏军王立群何洪彬

【机构】

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东北农业大学生命科学学院,山东省农业科学院奶牛研究中心

【出处】

：

安徽农业科学

【发表日期】

：

2012年16期

【关键词】

：

牛轮状病毒 VP4 基因克隆真核表达 Bovine rotavirus VP4 Gene cloning Eukaryotic expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（31072160）, 国家转基因重大专项（2009ZX08007-006B）, 济南市高校院所自主创新计划项目（201004027,201102034）, BRV强毒株的致弱研究项目（Y2009-D56）

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[目的]克隆获得牛轮状病毒VP4全基因,并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR技术,从牛轮状病毒总RNA中扩增出VP4基因,将其重组到含有Flag标签的pcDNA3.1（＋）载体中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,通过Lipofect2000TM转染293T细胞,细胞增殖后经RT-PCR和Western Blot检测VP4基因的表达。[结果]获得了VP4基因的阳性重组真核表达载体pcDNA3.1（＋）-VP4;转染293T细胞后经RT-PCR和Western Blot检测表明,该基因的重组表达载体构建正

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