【摘 要】
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目的探讨miR-494负调控ROCK1、PTEN进而抑制胰腺细胞凋亡并参与急性胰腺炎发生发展的机制研究。方法雨蛙素处理大鼠胰腺腺泡AR42J细胞，ELISA法检测细胞培养上清液中淀粉酶、TNF-α、IL-1、IL-6水平以验证急性胰腺炎细胞模型。RT-PCR检测正常AR42J细胞（对照组）、急性胰腺炎细胞模型（模型组）中的miR-494表达水平。流式细胞法检测对照组、转染阴性对照miRNA的急性胰
【机 构】
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西安交通大学第二附属医院急诊科, 710004,西安交通大学第二附属医院急诊科, 710004,西安交通大学第二附属医院急诊科, 710004,西安交通大学第二附属医院急诊科, 710004,西安交通
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目的探讨miR-494负调控ROCK1、PTEN进而抑制胰腺细胞凋亡并参与急性胰腺炎发生发展的机制研究。
方法雨蛙素处理大鼠胰腺腺泡AR42J细胞，ELISA法检测细胞培养上清液中淀粉酶、TNF-α、IL-1、IL-6水平以验证急性胰腺炎细胞模型。RT-PCR检测正常AR42J细胞（对照组）、急性胰腺炎细胞模型（模型组）中的miR-494表达水平。流式细胞法检测对照组、转染阴性对照miRNA的急性胰腺炎细胞模型（阴性对照组）以及转染miR-494的急性胰腺炎细胞模型（miR-494转染组）的细胞凋亡情况。Western Blot检测对照组、阴性对照组以及miR-494转染组中促凋亡蛋白ROCK1、PTEN的表达情况。
结果雨蛙素处理AR42J细胞8 h、12 h时的细胞培养上清液中的淀粉酶、TNF-α、IL-1、IL-6水平均显著高于0 h及对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），提示模型构建成功。急性胰腺炎细胞模型构建后8 h、12 h、24 h的miR-494表达水平均显著高于4 h时及对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。模型组的细胞凋亡比例显著高于对照组，miR-494转染组的细胞凋亡比例显著低于模型组，差异均有统计学意义（P<0.05）。miR-494转染组ROCK1、PTEN蛋白的表达水平均显著低于模型组和阴性对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。
结论急性胰腺炎发生时过表达的miR-494能够抑制促凋亡蛋白表达，从而抑制胰腺腺泡细胞凋亡并促进急性胰腺炎发生发展。
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