【摘 要】
：
目的 :构建真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,检测稳定转染后的GRC 1细胞的培养上清对于血管内皮细胞ECV30 4的生长以及转染细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 :构
【机 构】
：
第四军医大学唐都医院泌尿外科,第四军医大学唐都医院泌尿外科,第四军医大学医学遗传与发育生物学教研室,第四军医大学医学遗传与发育生物学教研室 陕西西安710038,陕西西安710038,陕西西安7100
论文部分内容阅读
目的 :构建真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,检测稳定转染后的GRC 1细胞的培养上清对于血管内皮细胞ECV30 4的生长以及转染细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法 :构建真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,并经BglⅡ/BamHI双酶切鉴定。通过脂质体介导 ,以该载体稳定转染GRC 1细胞 ,转染细胞中VEGF因子的表达情况用免疫组化染色法检测 ,转染细胞的培养上清对于ECV30 4细胞生长的影响用MTT法检测。结果 :经BglⅡ /BamHI双酶切证实 ,hPF4cDNA已成功地克隆到真核表达载体pcDNA3 CD34 SS中。RT PCR法检测证实 ,hPF4cDNA已成功地转染GRC 1细胞。免疫组化染色检测显示 ,转染PF4基因的GRC 1细胞的胞浆及胞膜均有VEGF表达 ,但较转染前明显减弱。细胞计数及MTT法显示 ,转染后GRC 1细胞的培养上清对ECV30 4细胞的生长具有抑制作用 ,吸光度值 (A)明显降低。结论 :构建了真核表达载体pcDNA3 PF4 SS ,并稳定转染GRC 1细胞。转染细胞的培养上清对ECV30 4细胞的生长及VEGF的表达 ,均具有明显的抑制作用 ,为探讨抗肿瘤生长机制和肿瘤疫苗的研制奠定了一定的基础。
其他文献
目的 探讨趋化因子RANTES刺激对人外周血单个核细胞(PMNC)的免疫活化作用及其内在机制.方法分离人外周血,应用不同终浓度的人重组RANTES(rhRANTES)以及抗CD3单克隆抗体(抗CD3mAb)进行体外刺激,并对增殖反应显著者给予吡咯啉烷二甲基硫脲(PDTC)或CTLA4Ig进行干预.采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法检测PMNC增殖程度,流式细胞仪检测淋巴细胞表型的变化.结果 rhRANT
目的 探讨肾母细胞瘤的治疗模式及提高肾母细胞瘤的治疗效果。方法 对 1998～2 0 0 1年明确诊断的 2 0例肾母细胞瘤采用多学科协作模式进行治疗 ,即以NWTS 5治疗方案为蓝本由
目的 提高对血汗症的认识,探讨其发病机制.方法报告1例特发性血汗症的临床及实验室特征,同时取患者皮肤标本进行病理及透射电镜检查.结果血汗症皮肤出血呈发作性,出血部位不固定,皮肤表面溢出物所含成分与外周血一致.除束臂试验阳性外,其他多种出凝血指标检查均阴性.病理及电镜检查可见皮内出血,表现和部分毛细血管闭塞,汗腺、毛囊和皮脂腺结构正常.结论血汗症是一罕见的皮肤出血性疾病,可能是一种特殊表现的血管炎。
目的 利用变性高效液相色谱分析技术 (denaturing high-performance liquid chromatography, DHPLC),检测2型常染色体显性遗传性多囊肾病致病基因(polycystic kidney disease gene 2, PKD2 )突变.方法收集临床确诊的汉族常染色体显性遗传性多囊肾病(autos omal dominant polycystic ki
目的 观察经颈内动脉灌注溶栓药治疗实验性视网膜中央动脉阻塞(CRAO)的效果及对全身的影响.方法对15只猫30只眼静脉注射光化学药物后激光照射猫视网膜动脉形成CRAO模型,随机分为3组:颈内动脉给药组、静脉给药组及空白对照组,每组5只猫10只眼,分别经颈内动脉、股静脉给予尿激酶(UK)溶栓,空白对照组仅静脉给予等渗盐液.通过荧光素眼底血管造影判断动脉再通情况,同时作血液生化指标检查以观察其对全身的
而随着国家公休制度的实施,国民拥有了越来越多的节假日,这一现象给了媒体另外一个竞争空间,并且随着社会的向前发展,这种竞争将会越来越激烈,因此,广播节目节假日的编排创新
【摘要】近几年，地球气候的不断变暖引起了人们对全球气候保护的关注，为控制各国碳排放量，减缓气候变暖的趋势，国际上制定了《京都议定书》。我国于1998年5月签署了《京都议定书》并于2002年8月核准，现今其第一期已经完成。然而在第二期即将开始时，承担较重任务的发达国家纷纷表示不满，美国甚至坚决退出，而即将承担减少碳排量任务的我国却仍然坚持签订《京都议定书》，很明显其对我国的经济发展有很大程度的限制，
嗜酸性淋巴肉芽肿又称局限性细胞朗格汉斯细胞组织细胞增生症,是单发或多发的局限性肉芽肿,多侵犯骨质,基本上是一种良性病变(1),此病临床较少见.我院自2000～2003年共收治腮腺
目的 评价产前和产后联合阻断措施对HBsAg、HBeAg阳性孕妇母婴传播的免疫效果.方法将HBsAg、HBeAg阳性的孕妇在产前检查时随机分成两组,乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)组:孕妇产前3个月(妊娠28周起)每4周肌内注射HBIG 400 IU直至临产;对照组:孕妇不注射HBIG.两组所生新生儿出生时及15 d时肌内注射HBIG,满月、2月和7月龄接种乙型肝炎疫苗,定期检测婴儿外周血的乙型肝炎
独墅湖高教区东南大学苏州研究院是从苏州地域性和东大历史性出发,以现代性对其加以诠释的一组教育建筑群体.设计从城市关系、规划架构、总体空间以及色彩材料等设计角度对周