逆转录病毒载体pOZ－KLF5的构建及鉴定

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：CHENYF20000

【摘要】

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为研究KLF5的相互作用蛋白从而深入探索其生物功能,构建了C端带有FLAG、HA、6x His三标签的p OZ-KLF5真核表达逆转录病毒载体。p OZ-KLF5载体可通过一次转录得到双顺反子转录

【作者】

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赵新宇王薇茜芦泽兰黄雷赵克温

【机构】

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上海交通大学医学院病理生理学教研室

【出处】

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生命科学研究

【发表日期】

：

2015年2期

【关键词】

：

KLF5 双顺反子转录真核表达三标签融合蛋白 KLF5 bicistronic transcription eukaryotic expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（81171888）

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为研究KLF5的相互作用蛋白从而深入探索其生物功能,构建了C端带有FLAG、HA、6x His三标签的p OZ-KLF5真核表达逆转录病毒载体。p OZ-KLF5载体可通过一次转录得到双顺反子转录单位,即一个转录物能表达两种独立存在的蛋白质：三标签融合蛋白KLF5-3x Tag和筛选标记——白细胞介素-2受体α（IL-2Rα）。通过偶联IL-2Rα抗体的磁珠成功筛选出KLF5-3x Tag表达阳性的293T细胞,经Western-blot检测细胞内KLF5-3x Tag表达情况及其对293T细胞增殖及周期

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