建立串联质谱法测定干血滤纸片中半乳糖神经酰胺酶(GALC)、酸性α－葡萄糖苷酶(GAA)、α－半乳糖苷酶(GLA)、α－L－艾杜糖苷酸酶(IDUA)活性。
方法方法学建立。收集2013年7月、11月在上海市新华医院新生儿筛查中心进行遗传代谢性疾病筛查的2 175份干血滤纸片标本和2012年9月至2014年1月在新华医院儿科就诊的20例溶酶体贮积病(lysosomal storage disorders，LSDs)患儿干血滤纸片样本。干血滤纸片提取液与酶底物及内标孵育后，经液液和固相萃取，氮气吹干，复溶后串联质谱分析酶反应产物和内标，计算酶活性。评价方法的线性、精密度、准确度和最低检测限；检测2 175份新生儿－干血滤纸片样本，0.5～99.5百分位数法确立4种酶活性参考区间；同时检测20例LSDs患儿干血滤纸片样本进行临床验证。
结果酶活性测定批内和批间精密度为1.7%～11.8%，批内和批间准确度为85%～115%，产物和内标实测浓度比值与添加的理论浓度比值线性系数为0.997～0.999。GALC、GAA、GLA和IDUA的最低检测限分别为0.03 μmol/(L·h)、0.09 μmol/(L·h)，0.12 μmol/(L·h)，0.16 μmol/(L·h)；初步确定新生儿酶活性参考区间分别为GALC[0.51～8.51 μmol/(L·h)]，GAA[1.99～22.22 μmol/(L·h)]，GLA[1.68～41.59 μmol/(L·h)]，IDUA [2.36～19.21 μmol/(L·h)]；20例LSDs患儿酶活性明显低于参考区间，串联质谱法能有效检出Krabbe、Pompe、Fabry、MPSⅠ患儿。
结论成功建立了串联质谱法检测干血滤纸片中GALC、GAA、GLA、IDUA活性。(中华检验医学杂志，2016, 39：761－765)