为了解冷冻食品中大肠杆菌污染情况，分析其潜在的食品安全问题，本研究从陕西省四个市（宝鸡、咸阳、西安和渭南）共收集冷冻食品样品360份（120份速冻水饺和240份冰淇淋）。通过选择培养和聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）进行大肠杆菌分离鉴定。然后对分离株进行21种毒力基因、23种耐药基因、15种抗生素耐药性检测及种群分型。360份样品中大肠杆菌污染率为13.6%（49/360），其中5份样品（10.2%，5/49）大肠菌群计数＞100 CFU/g。21种被检毒力基因中有9种毒力基因被检出，以肠外致病性大肠杆菌相关基因FyuA和iss的检出率最高（均为14.3%，7/49）。药敏结果显示，菌株对β-内酰胺类抗生素和叶酸代谢抑制剂的耐药最为普遍（均为98.0%，48/49），其次为四环素（10/49，20.4%）。其中β-内酰胺类主要编码基因为blaCTX和四环素主要编码基因为tetA。研究还发现1株分离株携带多粘菌素类抗性基因mcr-9。据我们所知，这是首次在冷冻食品被检出。此外，20.4%的菌株为多重耐药菌株，最高可对13种抗生素耐药。所有分离株共有4种系统发育群（A、B1、C和F），A群为优势群系（63.3%，31/49）。综上，陕西省典型冷冻食品中存在致病性大肠杆菌及耐多药菌株污染，存在通过食物链传播给人的风险。