【摘 要】
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目的 探讨miR-429靶向SIAH1基因对结直肠癌细胞系LOVO细胞增殖的影响.方法 采用qRT-PCR检测正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460和结直肠癌细胞系SW480、LOVO、HT-29中miR-429的表达.将miR-429 mimic和miR-429阴性对照序列(NC)转染至LOVO细胞,同时设置Control组.预测miR-429的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系.采用Western blot检测SIAH1蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布情况.结
【机 构】
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150001 哈尔滨 哈尔滨医科大学附属第一医院消化内科
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目的 探讨miR-429靶向SIAH1基因对结直肠癌细胞系LOVO细胞增殖的影响.方法 采用qRT-PCR检测正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460和结直肠癌细胞系SW480、LOVO、HT-29中miR-429的表达.将miR-429 mimic和miR-429阴性对照序列(NC)转染至LOVO细胞,同时设置Control组.预测miR-429的靶基因并用双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系.采用Western blot检测SIAH1蛋白的表达水平,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布情况.结果 qRT-PCR检测结果显示,相对于NCM460细胞,miR-429在各结直肠癌细胞系中的表达均降低(均P<0.001).双荧光素酶报告基因实验证实了SIAH1与miR-429的靶向关系.与NC组相比,过表达miR-429能抑制LOVO细胞中SIAH1蛋白的表达(P<0.001),细胞被阻滞在G0G1期,细胞增殖能力降低(P<0.001).结论 miR-429通过靶向SIAH1基因表达抑制LOVO细胞增殖.
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