【摘 要】
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目的：获得有活性的Sonic Hedgehog（SHH）蛋白N端结构域蛋白纯品,该结构域是SHH蛋白与受体结合结构域,可用作抗原,用于研制抗SHH的中和抗体。方法：应用PCR技术从商业化人Shh基因中
【机 构】
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沈阳药科大学,军事医学科学院生物工程研究所,枣庄市妇幼保健院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划（2012AA02A302）
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目的：获得有活性的Sonic Hedgehog（SHH）蛋白N端结构域蛋白纯品,该结构域是SHH蛋白与受体结合结构域,可用作抗原,用于研制抗SHH的中和抗体。方法：应用PCR技术从商业化人Shh基因中分别扩增该基因5＇端591和600 bp的片段,并插入真核表达载体pL293,分别在HEK293T细胞中进行瞬时分泌表达,通过His标签纯化后获得SHH-591和SHH-600蛋白纯品,SDS-PAGE和Western印迹对表达产物进行分析,并通过ELISA进行结合活性鉴定。结果：构建了重组表达载体pL293
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