探讨氧化损伤和硒对关节软骨细胞凋亡和硒蛋白基因表达的影响。
方法采用细胞培养方法，培养人软骨细胞C28/I2。培养24 h后分别用亚硒酸钠（Na2SeO3）预保护或叔丁基过氧化氢（tBHP）孵育24 h，建立软骨细胞氧化损伤模型。实验分为对照组（C组，0.00 mg/L Na2SeO3+ 0.00 μmol/L tBHP）、单纯硒预保护组（S2组，0.10 mg/L Na2SeO3）、氧化损伤组（O组，150.00 μmol/L tBHP）、低剂量硒预保护组（OS1组，0.05 mg/L Na2SeO3+ 150.00 μmol/L tBHP）、中剂量硒预保护组（OS2组，0.10 mg/L Na2SeO3+ 150.00 μmol/L tBHP）、高剂量硒预保护组（OS3组，0.15 mg/L Na2SeO3+ 150.00 μmol/L tBHP）。24 h后，采用Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡情况，实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）、GPX4、脱碘酶2（DIO2）、DIO3、硒蛋白基因P（SEPP1）、硫氧还蛋白还原酶1（TrxR-1）和硒蛋白基因W（Sel W）mRNA表达水平，实验均重复3次。
结果C、S2、O、OS1、OS2、OS3组人软骨细胞凋亡率分别为（0.78 ± 0.06）%、（13.61 ± 7.11）%、（92.27 ± 3.44）%、（71.38 ± 5.22）%、（44.31 ± 9.16）%、（72.46 ± 4.69）%，组间比较差异有统计学意义（F= 120.10，P < 0.01）。O组人软骨细胞凋亡率高于C组（P < 0.05）；与O组比较，OS1、OS2、OS3组细胞凋亡率均明显降低（P均< 0.05），OS2组降低最明显。6组细胞DIO2、SEPP1、GPX1、GPX4、TrxR-1、Sel W mRNA水平组间比较，差异均有统计学意义（F= 24.60、14.53、127.60、30.60、637.10、59.64，P均< 0.01）。与C组（1.00 ± 0.00）比较，O组GPX1（0.10 ± 0.05）、GPX4（0.43 ± 0.09）、TrxR-1（0.11 ± 0.05）、Sel W（0.72 ± 0.15）mRNA相对表达水平显著降低（P均< 0.05）；与O组比较，OS1、OS2、OS3组GPX1 mRNA相对表达水平（0.20 ± 0.03、0.74 ± 0.10、0.30 ± 0.07）明显升高（P均< 0.05）。
结论硒蛋白基因表达下调参与氧化损伤致关节软骨细胞凋亡过程，硒对关节软骨细胞硒蛋白基因表达具有一定的调控作用。