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目的
构建CD以及VP22-CD基因工程化载体，并探讨其在体外对胶质瘤细胞的杀伤作用。
方法利用聚合酶链式反应(PCR)得到CD以及VP22基因片段；利用In-fusion基因克隆方法将得到的基因片段插入到pEGFP-N1载体中，构建CD以及VP22-CD基因工程化载体；利用脂质体转染的方法将构建的基因工程化载体转染到胶质瘤细胞C6及U87细胞中，并通过体外光镜及荧光显微镜观察转染率；利用MTT比色法评价加入前药5-氟胞嘧啶后对转染后胶质瘤细胞的杀伤率。
结果(1)将CD基因或VP22-CD融合基因插入到pEGFP-CD载体中，构建得到pEGFP-CD以及pEGFP-VP22-CD载体。(2)pEGFP-CD及pEGFP-VP22-CD载体可转染入C6或U87胶质瘤细胞，转染率分别为2.5%和3.7%以及2.0%和4.1%。(3)在C6或U87细胞中转染pEGFP-CD或pEGFP-VP22-CD载体并加入前药5-氟胞嘧啶后，细胞的存活率分别为(30.36±0.63)%和(11.75±1.01)%以及(28.78±3.62)%和(18.26±2.27)%，与转染pEGFP-N1组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。(4)在C6或U87细胞中加入前药5-氟胞嘧啶后，转染pEGFP-VP22-CD组与转染pEGFP-CD组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论CD/5-FC系统在体外对恶性胶质瘤细胞具有显著的杀伤作用和旁观者效应；并且穿梭蛋白VP22可进一步促进系统对细胞的杀伤作用。