人肝脏再生增强因子cDNA的克隆,表达及纯化

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sgaini1532
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克隆人肝脏再生增强因子(hALR)cDRNA,构建重组表达载体并对其诱导表达,纯化。方法:提取胎儿肝组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增出hALRcDNA,克隆于载体pGEM-T,酶切鉴定后亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,测序证实序列正确并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白GST-hALR,表达物通过谷胱甘肽Sepharose4B亲和层析纯化后进行Thrombin酶切,
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