【摘 要】
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目的 观察胚胎后肾细胞微环境诱导核移植胚胎干细胞( ntESCs)分化为肾系细胞的作用.方法 分离小鼠ntESCs样集落,对ntESCs进行鉴定.将核移植拟胚体(ntEBs)与胚胎后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测诱导后ntEBs与对照组中肾组织Wilms瘤抑癌因子1(WT-1)、Wnt-4、同源盒基因2(pax-2)、c-Ret、足细胞标记蛋白( po
【机 构】
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530021南宁,广西医科大学第一附属医院人类精子库广西医科大学泌尿科学研究所,广西医科大学第一附属医院泌尿外科广西医科大学泌尿科学研究所,广西医科大学医学科学实验中心,广西医科大学第一附属医院生殖医
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目的 观察胚胎后肾细胞微环境诱导核移植胚胎干细胞( ntESCs)分化为肾系细胞的作用.方法 分离小鼠ntESCs样集落,对ntESCs进行鉴定.将核移植拟胚体(ntEBs)与胚胎后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测诱导后ntEBs与对照组中肾组织Wilms瘤抑癌因子1(WT-1)、Wnt-4、同源盒基因2(pax-2)、c-Ret、足细胞标记蛋白( podocalyxin)和Nephrin的mRNA表达；免疫荧光染色法检测诱导后ntEBs与对照组的Pax-2、WT-1蛋白表达.结果 mESCs集落性生长,符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性.ntEBs共培养组WT-1、Wnt-4、pax-2、c-Ret、podocalyxin和Nephrin均有表达,而对照组则为阴性；免疫荧光结果显示ntEBs细胞诱导分化后Pax-2荧光强度为(++)；而实验组WT-1荧光强度(+)也优于对照组的(±).结论 后肾细胞微环境可促进核移植胚胎来源ntESCs分化为肾系细胞。
其他文献
有研究结果显示Tamm—Horsfall蛋白（THP）是一种与尿路结石形成密切相关的大分子有机物。我们通过观察枸橼酸钾干预下肾结石大鼠肾组织内THP的表达，了解枸橼酸钾对THP表达的影响，探讨枸橼酸钾抑制结石形成的机制及枸橼酸钾与THP的关系。
目的 探讨化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)在结肠癌细胞SW480和肝癌细胞HepG2对免疫共抑制分子B7-H1表达的诱导及机制.方法 5-Fu处理细胞后24 h用免疫荧光和流式细胞仪检测5-Fu对B7-H1蛋白表达的影响,在3～24h用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测其mRNA水平.结果 5-Fu(10 μg/L)处理这两种细胞24h后可探测出增强的B7-H1免疫荧光信号,流式细胞仪检测
Pokemon是近来发现的一个原癌基因,其蛋白产物不仅可以使癌细胞获得抗老化和抗凋亡的能力,还能调控其他癌基因、抑癌基因的活性,因此被认为是肿瘤的总开关[1].我们应用体外合成的针对Pokemon的小分子干扰RNA (siRNA)转染膀胱癌细胞,观察其对Pokemon的表达及膀胱癌细胞凋亡与增殖的影响。
目的 检测不同级别脑胶质瘤患者血清及脑脊液中游离DNA的含量及完整性,探讨其对脑胶质瘤的诊断及预后判断的意义.方法 术前采集70例脑胶质瘤患者和22例健康对照的外周血；其中30例胶质瘤患者同时采集脑脊液.通过实时荧光定量聚合酶链反应( RT-qPCR)方法检测血清及脑脊液中游离DNA短串联重复序列(ALU)的长片段(247 bp)与短片段(115 bp)的含量以及DNA完整性.结果 血清中ALU-
目的 检测X-盒结合蛋白1(XBP1),血管内皮生长因子C(VEGF-C)在肝癌组织中的表达,探讨在肝癌发生发展过程中存在未折叠蛋白反应(UPR)的激活.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测术中取的新鲜42例肝癌标本、15例同个体癌旁1.0cm肝组织和15例正常肝组织中XBP1 、VEGF-C的mRNA表达,应用Western blot法检测57例肝癌组织和正常肝组织标本中XBP1
乙酰肝素酶( HPSE)是体内唯一能够分解硫酸肝素的糖苷内切酶.除了在恶性肿瘤转移中有重要作用外[1],HPSE还在成骨细胞、破骨细胞中表达,参与骨折创伤的修复过程[2]和正常骨组织的形成[3].本研究旨在观察大鼠骨髓基质细胞成骨分化过程中HPSE的表达。
目的 比较肝癌细胞中线粒体DNA变异,探讨线粒体DNA变异与肝癌细胞成瘤能力、血清饥饿耐受性以及对化疗药物敏感性的关系.方法 DNA直接测序法检测肝癌细胞中线粒体DNA变异；噻唑蓝(MTT)比色法检测肝癌细胞活力和顺铂对肝癌细胞生长抑制率,裸鼠皮下接种肝癌细胞检测成瘤能力.结果 肝癌细胞线粒体D-loop区变异点数目:肝星形细胞(HSC,16)、BEL-7402(11)、HepG2(11)；环氧化
p53 codon 72多态性与肺癌、食管癌、肝癌、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤相关,而鼠双微基因2( MDM2)309多态性与食管癌、肺癌、贲门癌、鼻咽癌易感性相关.Morote等[1]研究结果显示KLK2、硫酸转移酶-A1(SULT1A1)和Toll样受体4(TLR4)基因多态性可以用于前列腺根治术后生化复发的预测.本研究旨在观察这些基因多态性对前列腺癌根治术后的生化复发是否
微小RNA(microRNA,简称miRNA),尤其是miRNA可对肿瘤细胞的增殖起调控作用,参与多种肿瘤的发生、发展,是当前生物医学研究的热点.由于miRNA可以在转录后水平调控基因的表达,因此被认为是mRNA反作用于基因组DNA的典型.表观遗传学的研究是在不改变基因组DNA序列的前提下,在转录前水平调控基因组DNA表达,其中最重要的是DNA甲基化和组蛋白去乙酰化[1].可见,miRNA的出现和
间充质干细胞( MSC)能够自我增殖,多向分化[1-2],且具有免疫调节等功能,在人类白细胞抗原( HLA)并不匹配的情况下输注同种异体MSC,一般不会引起宿主的免疫反应[3-4],使MSC作为临床治疗的一种手段成为可能。