菰黑粉菌UePkaC基因的克隆及功能研究

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beautyfox110
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菰黑粉菌(Ustilago esculenta)是一种二态性真菌,具有侵染菰(Zizania latifolia)植株的能力,并可使植株茎部膨大形成茭白.二型态转换对菰黑粉菌的侵染能力及致病性至关重要.促丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号级联途径和环化腺苷酸介导的蛋白激酶A(cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A,cAMP-PKA)信号转导途径是真菌二型态转换的核心.本研究发现,外源添加cAMP后单倍体出现多位点芽殖现象,且融合菌丝生长受到影响.进一步克隆得到了编码菰黑粉菌PKA催化亚基的基因UePkaC(PkaC like protein in Ustilago esculenta)基因(GenBank No.KR870334.1).序列分析结果显示,该基因全长1346 bp,有1个内含子,两个外显子构成大小为1233 bp的开放阅读框,编码410个氨基酸.该氨基酸序列与其他物种中PKA催化亚基的氨基酸序列同源,如大麦坚黑粉菌(U.hordei)、玉米瘤黑粉菌(U.maydis).表达模式分析发现:UePkaC在菌丝融合生长过程中上调表达;对UePkaC缺失突变体表型分析发现其变长且无融合生长能力和致病性.进一步研究发现,UePkaC突变后无法形成接合管,且信息素合成基因表达受到显著抑制,表明UePkaC基因通过调控a基因的表达从而影响接合管的形成与细胞融合.以上结果表明,UePkaC基因在菰黑粉菌单倍体生长及二型态转换中起着关键作用.该研究为探讨菰黑粉菌的致病机理提供了基础资料.
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