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【摘要】目的：建立以高效液相色谱法测定康尔心胶囊中丹参酮ⅡA的含量方法。方法：色谱柱为Kromasil C18（46mm×250mm；5μm）；流动相为甲醇-水（75∶25）；流速为10mL/min；检测波长为270nm。结果：丹参酮ⅡA在01598～3196μg范围内呈良好的线性关系（r=09995），加样回收率为98192%（RSD=046%）。结论：该方法准确可靠、专属性好，可用于康尔心胶囊的质量控制。
【关键词】康尔心胶囊；高效液相色谱法；丹参
【中图分类号】R2841【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）19-0117-02
康尔心胶囊由三七、人参、麦冬、丹参、枸杞子、何首乌、山楂等7味中药组成，具有益气活血、滋阴补肾之功效，能够增加冠脉血流量，降血脂，用于治疗冠心病、心胶痛、胸闷气短等症，是临床常用的中成药。处方中的丹参具有活血化瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的疗效，用于胸痹心痛、心烦不眠等症，而丹参酮ⅡA是其主要活性成分。本品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，但标准中只对性状、理化鉴别及检查项确定了检验标准，并未对其主成分丹参进行质量控制。为了控制康尔心胶囊的药品质量，笔者采用高效液相色谱法对其处方中的丹参酮ⅡA进行了定量分析[1-7]。报告如下。
1仪器与材料
11仪器岛津LC-2010A型高效液相色谱仪（包括LC-2010型紫外检测器， LC solution色谱工作站）；微孔滤膜（045μm）；BSA224S-CW型万分之一电子天平（赛多利斯科学有限公司）；BP211D型十万分之一电子天平（赛多利斯科学有限公司）；HQ3120型超声仪（翡纳米科技发展有限公司）。
12材料康尔心胶囊（批号：141001、141004、151004，辽宁可济药业有限公司），丹参酮ⅡA对照品（批号：110766-200619，中国药品生物制品检定所），甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂为分析纯。
2含量测定
21色谱条件及系统适应性研究色谱柱Kromasil C18（46mm×250mm；5μm）；流动相为甲醇-水（75∶25）；流速为10mL/min；柱温为室温；检测波长为270nm；进样量为10μL；理论板数：按丹参酮ⅡA计算不低于2000。分离度大于15，峰形良好，阴性无干扰（见图1）。
22对照品溶液的制备精密称取001598g丹参酮ⅡA对照品，置50mL的棕色容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，混匀，得对照品的储备液。再精密吸取5mL对照品储备液置10mL的棕色容量瓶中，用甲醇定容，混匀。
23供试品溶液的制备取研细的内容物约10g，精密称定，置带塞锥形瓶中，精加50mL甲醇，称定重重，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
24空白试验按照处方制法制备无丹参的阴性对照样品，按照“23供试品溶液的制备”的方法制备。
25线性关系考察分别吸取1、5、10、15、20μL对照品溶液注入LC-2010A型高效液相色谱仪，记录高效液相色谱图。横坐标（X）为对照品进样量为，纵坐标（Y）为峰面积积分值，绘制标准曲线，回归方程为Y=462+518158X，r=09995，结果表明丹参酮ⅡA在01598～3196μg范围内有良好的线性关系。
26稳定性试验取“23项下的供试品溶液”，分别于0、2、4、8、12、48h时测定，记录峰面积，RSD为078%。表明供试品溶液在48h内是比较稳定的。
27重复性试验分别取5份样品（批号为141001），制备方法同供试品溶液，测定，RSD为081%，说明该方法的重复性良好。
28精密度试验精密吸取10μL对照品溶液，重复进样6次，记录对照品峰面积，RSD为063%，说明仪器有良好的精密度。
29加样回收率试验精密称取已知丹参酮ⅡA含量的样品（含量为61919mg/g）05g，分别精密加入丹参酮ⅡA对照品，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率，结果见表1。
210样品含量测定分别取3批样品，按上述方法制备供试品溶液，测定含量，结果见表2。
3讨论
31研究对康尔心胶囊中丹参的主要有效成分丹参酮ⅡA建立了含量测定方法，结果可靠，对改进康尔心胶囊制剂的质量标准有一定意义。
32为了保证样品中丹参酮ⅡA被充分提取出来，分别采用回流05h、回流1h，回流2h和超声30min的不同提取时间，50%甲醇，70%甲醇，甲醇不同提取溶剂进行了考察，测定结果表明回甲醇作为提取溶剂，回流提取1h有效成分能被充分提取出来[8-9]。
33将流动相甲醇-水比例调整为（70∶[KG-*3/5]30）、（75∶[KG-*3/5]25）、（65∶[KG-*3/5]35）分别进行试验，结果甲醇-水（75∶[KG-*3/5]25）分离效果最好。
[LL]
参考文献
[1] 卫生部药典委员会.中国人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂（第一册）[S].1989.
[2] 李玉珍，陈日来，陈晓凯，等.高效液相色谱法测定复方丹参片和滴丸中丹酚酸B和丹参酮IIA的含量[J].中国医药学杂志，2005，25（6）：523-525.
[3] 汤杰，宋冰娜，郑盼，等.HPLC测定冠心丹参胶囊中主成分的含量[J].中国现代中药，2015，20（10）：66.
[4] 王东升，苗小楼，张世栋，等.HPLC法测定丹翘灌注液中丹参酮ⅡA的含量[J].中兽医医药杂志，2015，（6）：316.
[5] 夏崇才，周芙琼，顾宁，等.HPLC法测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA含量[J].亚太传统医药，2015，1（11）：30.
[6] 郭强.筋骨痛消丸质量标准研究[J].中医监床研究，2015，2（7）：7.
[7] 潘红宇，刘跃胜，项海芝.参七胶囊的质量控制方法[J].药物分析杂志，2015，3（32）：213.
[8] 张小红，梁洁，肖雪，等.HPLC法测定林芝地区丹参中丹参酮IIA含量研究[J].亚太传统医药，2015，12（11）：17.
[9] 刘义梅，李孟芝.复方肝舒丸的质量标准研究[J].中南民族大学学报（自然科学版），2015，（2）：38-43.
（编辑：程鹏飞）
【关键词】康尔心胶囊；高效液相色谱法；丹参
【中图分类号】R2841【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）19-0117-02
康尔心胶囊由三七、人参、麦冬、丹参、枸杞子、何首乌、山楂等7味中药组成，具有益气活血、滋阴补肾之功效，能够增加冠脉血流量，降血脂，用于治疗冠心病、心胶痛、胸闷气短等症，是临床常用的中成药。处方中的丹参具有活血化瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的疗效，用于胸痹心痛、心烦不眠等症，而丹参酮ⅡA是其主要活性成分。本品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，但标准中只对性状、理化鉴别及检查项确定了检验标准，并未对其主成分丹参进行质量控制。为了控制康尔心胶囊的药品质量，笔者采用高效液相色谱法对其处方中的丹参酮ⅡA进行了定量分析[1-7]。报告如下。
1仪器与材料
11仪器岛津LC-2010A型高效液相色谱仪（包括LC-2010型紫外检测器， LC solution色谱工作站）；微孔滤膜（045μm）；BSA224S-CW型万分之一电子天平（赛多利斯科学有限公司）；BP211D型十万分之一电子天平（赛多利斯科学有限公司）；HQ3120型超声仪（翡纳米科技发展有限公司）。
12材料康尔心胶囊（批号：141001、141004、151004，辽宁可济药业有限公司），丹参酮ⅡA对照品（批号：110766-200619，中国药品生物制品检定所），甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂为分析纯。
2含量测定
21色谱条件及系统适应性研究色谱柱Kromasil C18（46mm×250mm；5μm）；流动相为甲醇-水（75∶25）；流速为10mL/min；柱温为室温；检测波长为270nm；进样量为10μL；理论板数：按丹参酮ⅡA计算不低于2000。分离度大于15，峰形良好，阴性无干扰（见图1）。
22对照品溶液的制备精密称取001598g丹参酮ⅡA对照品，置50mL的棕色容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，混匀，得对照品的储备液。再精密吸取5mL对照品储备液置10mL的棕色容量瓶中，用甲醇定容，混匀。
23供试品溶液的制备取研细的内容物约10g，精密称定，置带塞锥形瓶中，精加50mL甲醇，称定重重，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
24空白试验按照处方制法制备无丹参的阴性对照样品，按照“23供试品溶液的制备”的方法制备。
25线性关系考察分别吸取1、5、10、15、20μL对照品溶液注入LC-2010A型高效液相色谱仪，记录高效液相色谱图。横坐标（X）为对照品进样量为，纵坐标（Y）为峰面积积分值，绘制标准曲线，回归方程为Y=462+518158X，r=09995，结果表明丹参酮ⅡA在01598～3196μg范围内有良好的线性关系。
26稳定性试验取“23项下的供试品溶液”，分别于0、2、4、8、12、48h时测定，记录峰面积，RSD为078%。表明供试品溶液在48h内是比较稳定的。
27重复性试验分别取5份样品（批号为141001），制备方法同供试品溶液，测定，RSD为081%，说明该方法的重复性良好。
28精密度试验精密吸取10μL对照品溶液，重复进样6次，记录对照品峰面积，RSD为063%，说明仪器有良好的精密度。
29加样回收率试验精密称取已知丹参酮ⅡA含量的样品（含量为61919mg/g）05g，分别精密加入丹参酮ⅡA对照品，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率，结果见表1。
210样品含量测定分别取3批样品，按上述方法制备供试品溶液，测定含量，结果见表2。
3讨论
31研究对康尔心胶囊中丹参的主要有效成分丹参酮ⅡA建立了含量测定方法，结果可靠，对改进康尔心胶囊制剂的质量标准有一定意义。
32为了保证样品中丹参酮ⅡA被充分提取出来，分别采用回流05h、回流1h，回流2h和超声30min的不同提取时间，50%甲醇，70%甲醇，甲醇不同提取溶剂进行了考察，测定结果表明回甲醇作为提取溶剂，回流提取1h有效成分能被充分提取出来[8-9]。
33将流动相甲醇-水比例调整为（70∶[KG-*3/5]30）、（75∶[KG-*3/5]25）、（65∶[KG-*3/5]35）分别进行试验，结果甲醇-水（75∶[KG-*3/5]25）分离效果最好。
[LL]
参考文献
[1] 卫生部药典委员会.中国人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂（第一册）[S].1989.
[2] 李玉珍，陈日来，陈晓凯，等.高效液相色谱法测定复方丹参片和滴丸中丹酚酸B和丹参酮IIA的含量[J].中国医药学杂志，2005，25（6）：523-525.
[3] 汤杰，宋冰娜，郑盼，等.HPLC测定冠心丹参胶囊中主成分的含量[J].中国现代中药，2015，20（10）：66.
[4] 王东升，苗小楼，张世栋，等.HPLC法测定丹翘灌注液中丹参酮ⅡA的含量[J].中兽医医药杂志，2015，（6）：316.
[5] 夏崇才，周芙琼，顾宁，等.HPLC法测定冠心Ⅴ号合剂中丹参酮ⅡA含量[J].亚太传统医药，2015，1（11）：30.
[6] 郭强.筋骨痛消丸质量标准研究[J].中医监床研究，2015，2（7）：7.
[7] 潘红宇，刘跃胜，项海芝.参七胶囊的质量控制方法[J].药物分析杂志，2015，3（32）：213.
[8] 张小红，梁洁，肖雪，等.HPLC法测定林芝地区丹参中丹参酮IIA含量研究[J].亚太传统医药，2015，12（11）：17.
[9] 刘义梅，李孟芝.复方肝舒丸的质量标准研究[J].中南民族大学学报（自然科学版），2015，（2）：38-43.
（编辑：程鹏飞）