论文部分内容阅读
目的：探讨一种新的离体培养大鼠海马神经元基因转染方法。方法：选用17d的胚胎SD大鼠，取海马组织分离成细胞悬液，离心去上清并用混有2μg CAG-RE质粒的电转液重悬，置Neucleofector电转染仪中，选用0—03程序进行电转染，后用基础神经元培养液稀释并接种于培养皿中，4h后，待细胞贴壁时换新的神经元维持培养液，继续培养，选择不同时间点在荧光显微镜下观察，并计算在转染后4d时神经元的转染效率。结果：电转染24h后可以观察到有绿色荧光蛋白表达的转染神经元，荧光可以持续表达到2周，转染效率可达60％～