电穿孔转染悬浮细胞条件的优化

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suyu_001
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目的 以RNA依赖性腺嘌呤脱氮酶(ADAR1)为靶基因优化悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的电穿孔转染条件.方法 通过控制电压、温度、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合将靶向ADAR1的sRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察、细胞计数、台盼蓝拒染试验来计算sRNA序列转染率和细胞存活率.结果 小鼠原代淋巴细胞在400 V,40 μs条件下可获得最大转染率,约为30.6;良好的细胞状态以及低温条件可获得更好的转染效果.结论 电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过优化其转染条件,可以提高其对悬浮细胞的转染率.
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